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自然基因科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第18年
選擇正確的泵2008/01/17
選擇正確的泵泵的類型注射泵:電機(jī)驅(qū)動(dòng)螺桿(導(dǎo)向螺桿)慢慢旋轉(zhuǎn),將注射器的活塞推入,并且將注射液推出。電機(jī)反方向旋轉(zhuǎn)可以回吸液體。優(yōu)點(diǎn):工作壓力高于1500psi;zui高精度
微孵育2008/01/17
微孵育成像和記錄室的加熱:儀器應(yīng)用的基本原理。為什么要加熱?長(zhǎng)期以來(lái),科研人員早已理解了溫度調(diào)節(jié)在細(xì)胞功能研究中的重要性。例如,在Medline檢索中輸入關(guān)鍵詞“溫度”和“細(xì)胞”,從1995年后可以查到超過(guò)12,000篇相關(guān)文獻(xiàn)。其中,大部分的文獻(xiàn)都著重研究溫度對(duì)細(xì)胞的生物物理和代謝功能的影響。此外,成像系統(tǒng)的光學(xué)性能對(duì)溫度也極其敏感,這是因?yàn)?,隨著物鏡溫度的變化,成像系統(tǒng)的焦平面會(huì)產(chǎn)生偏移,早已有相關(guān)文獻(xiàn)揭示了這一點(diǎn)。因此,對(duì)于在記錄環(huán)境中研究細(xì)胞功能的科研人員來(lái)說(shuō),嚴(yán)格的溫度控制的重要性是不
微注射簡(jiǎn)介2008/01/17
微注射簡(jiǎn)介以細(xì)胞內(nèi)微注射和微灌注技術(shù)為基礎(chǔ)的玻璃針頭(GlassNeedle)(精細(xì)的玻璃微量毛細(xì)移液管)的使用,已經(jīng)在越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)生物學(xué)研究領(lǐng)域中成為一項(xiàng)非常普遍的操作方法,比如在體外受精、轉(zhuǎn)基因中等等。這些技術(shù)zui恰當(dāng)?shù)脑拺?yīng)當(dāng)稱其為顯微外科操作,因?yàn)檫@些操作是通過(guò)單個(gè)的或多個(gè)的筒狀玻璃微量移液管、的定位裝置(顯微操縱器)以及微量注射器或微量灌注器來(lái)在單個(gè)的細(xì)胞上進(jìn)行的。這些操作中所使用的微量移液管是用一毛細(xì)管拉針器(pipettepuller)來(lái)制作的,先將玻璃毛細(xì)管加熱到其熔化的溫度,
多肽知識(shí)2008/01/17
多肽知識(shí)◎多肽的保存多肽在-20℃很穩(wěn)定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前,冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí),的方法是以小的工作樣量存放。對(duì)于含Cys,MetorTrP的多肽,脫氧緩沖劑對(duì)其溶解*,因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化,在封瓶前,慢慢流過(guò)多肽的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有這些肽與不含這些有問(wèn)題解苷的那些肽相比,生命期有限?!蚨嚯牡娜芙庑源蠖鄶?shù)肽的溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對(duì)于堿性或酸性多肽的溶解
電穿孔技術(shù)在轉(zhuǎn)基因及動(dòng)物克隆中的應(yīng)用2008/01/17
電穿孔技術(shù)在轉(zhuǎn)基因及動(dòng)物克隆中的應(yīng)用電穿孔技術(shù)在轉(zhuǎn)基因及動(dòng)物克隆中的應(yīng)用ApplicationofElectroporationinGeneTransferandAnimalEmbryoCloning郝新保范清宇HaoXin-baoFanQing-yu第四軍醫(yī)大學(xué)全軍骨腫瘤研究所西安710038InstituteofOrthopedicOncology,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi"an710038,China摘要電穿孔技術(shù)利用電場(chǎng)造成細(xì)胞膜的改變從而將D
彗星分析法(單細(xì)胞凝膠電泳分析法)2008/01/17
治愈癌癥是一個(gè)難題,長(zhǎng)期以來(lái)科學(xué)家們一直在苦苦探索.我們目前知道,致癌的過(guò)程與許多因素有關(guān),但如果我們能阻止其中的任何一個(gè)步驟,癌細(xì)胞便無(wú)法形成。因此,探測(cè)致癌物質(zhì)的技術(shù)與癌細(xì)胞的及時(shí)發(fā)現(xiàn)就顯得尤其重要!然而截至目前為止,科學(xué)家們?nèi)詿o(wú)法研究出一種簡(jiǎn)易基因測(cè)試法或綜合的方法來(lái)檢測(cè)出可能的致癌物。因此,致癌物對(duì)DNA的作用仍是癌癥研究的一個(gè)重要課題。遺傳毒物學(xué)為一專門研究化學(xué)及各類物質(zhì)對(duì)人體遺傳基因影響的科學(xué)。人體每天暴露在大量的化學(xué)物質(zhì)當(dāng)中,為了診測(cè)這些物質(zhì)對(duì)人體DNA的影響,科學(xué)家們發(fā)明了多種測(cè)
金相學(xué)與材料學(xué)的相關(guān)知識(shí)2008/01/17
1863年英國(guó)的H.C.Sorby(以下簡(jiǎn)稱索氏)用顯微鏡觀察經(jīng)拋光并腐刻的鋼鐵試片,從而揭開了金相學(xué)的序幕。他在鍛鐵中觀察到類似魏氏在鐵隕石中觀察到的組織,并稱之為魏氏組織。后來(lái)他又進(jìn)一步完善了金相拋光技術(shù),例如把鋼樣磨成01025毫米的試片,并在攝影師的協(xié)助下拍攝了鋼與鐵的顯微像,基本上搞清了其中的主要相,并對(duì)鋼的淬火、回火等相變作了到現(xiàn)在看來(lái)還基本上是正確的解釋。索氏是*的金相學(xué)創(chuàng)建人,特別是在英國(guó)和美國(guó),都在1963年召開了金相學(xué)誕生一百周年報(bào)告會(huì)[4,5],紀(jì)念索氏在1863年的發(fā)現(xiàn)(
顯微鏡的基礎(chǔ)知識(shí)2008/01/17
*章:顯微鏡簡(jiǎn)史隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,人們?cè)絹?lái)越需要觀察微觀世界,顯微鏡正是這樣的設(shè)備,它突破了人類的視覺(jué)極限,使之延伸到肉眼無(wú)法看清的細(xì)微結(jié)構(gòu)。顯微鏡是從十五世紀(jì)開始發(fā)展起來(lái)。從簡(jiǎn)單的放大鏡的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出來(lái)的單透鏡顯微鏡,到結(jié)構(gòu)復(fù)雜的復(fù)式顯微鏡,以及相差,熒光,偏光,顯微觀察方式的出現(xiàn),使之更廣范地應(yīng)用于醫(yī)學(xué),生物學(xué),金屬材料,化工等領(lǐng)域。第二章顯微鏡的基本光學(xué)原理一.折射和折射率光線在均勻的各向同性介質(zhì)中,兩點(diǎn)之間以直線傳播,當(dāng)通過(guò)不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí),則發(fā)生折射現(xiàn)象,這是由于光在不同介質(zhì)
多肽化學(xué)合成知識(shí)2008/01/17
多肽是涉及生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能的生物活性物質(zhì)。它是分子結(jié)構(gòu)介于氨基酸和蛋白質(zhì)之間的一類化合物,由多種氨基酸按照一定的排列順序通過(guò)肽鍵結(jié)合而成。到現(xiàn)在,人們已發(fā)現(xiàn)和分離出一百多種存在于人體的肽,對(duì)于多肽的研究和利用,出現(xiàn)了一個(gè)的繁榮景象。多肽的合成不僅具有很重要的理論意義,而且具有重要的應(yīng)用價(jià)值。通過(guò)多肽合成可以驗(yàn)證新的多肽結(jié)構(gòu);設(shè)計(jì)新的多肽,用于研究結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系;為多肽生物合成反應(yīng)機(jī)制提供重要信息;建立模型酶以及合成新的多肽藥物等。1963年,R.B.Merrifield創(chuàng)立了將多肽羧基端的
多肽的溶解和保存2008/01/17
建議先用少量肽來(lái)試驗(yàn)zui適溶解方法,只有當(dāng)多肽*溶解后,才能加入溶液并將之稀釋至zui終濃度。即先溶解,后加入緩沖液。注意:總是將多肽加入到適當(dāng)溶劑中攪拌,而不能采用其它方式。凍干多肽的溶解多肽溶解中的主要問(wèn)題是二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除了zui短的肽鏈外,該現(xiàn)象發(fā)生在幾乎所有肽鏈,與極性無(wú)關(guān)。因此,溶解多肽的*個(gè)原則是用無(wú)菌的蒸餾水或去離子水(如果條件允許則用無(wú)氧水)。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解。為避免該現(xiàn)象的發(fā)生,多肽應(yīng)溶解在無(wú)菌的蒸餾水中,或者用0.45或0.2
肽鏈的設(shè)計(jì)2008/01/17
多肽是復(fù)雜的大分子,因此每條序列在物理和化學(xué)特性上都是*的。有些多肽合成很困難,另有些多肽雖然合成相對(duì)容易,但純化困難。zui常見的問(wèn)題是許多肽不溶于水溶液,因此在純化中,這些疏水肽必須溶于非水溶劑中,或特殊的緩沖液,而這些溶劑或緩沖液很可能不適合應(yīng)用于生物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),因此研究人員不能使用該肽達(dá)到自己的目的,因此下面是對(duì)于研究人員設(shè)計(jì)多肽的一些建議。合成困難肽的選擇1.減少序列長(zhǎng)度由于肽的長(zhǎng)度增加導(dǎo)致粗產(chǎn)物純度降低,小于15個(gè)殘基的肽能較容易得到。當(dāng)肽鏈長(zhǎng)度增加到20個(gè)殘基以上時(shí),正確產(chǎn)物的量就是
抗原多肽設(shè)計(jì)2008/01/17
為了使產(chǎn)生的抗體獲得*效果,仔細(xì)地設(shè)計(jì)抗原多肽是很有必要的,設(shè)計(jì)應(yīng)滿足一個(gè)基本條件:在免疫過(guò)程中,該抗原既不會(huì)產(chǎn)生過(guò)強(qiáng)的免疫反應(yīng),同時(shí)又能產(chǎn)生出對(duì)感興趣的蛋白有結(jié)合能力的抗體??乖O(shè)計(jì)是一個(gè)很復(fù)雜的課題,有諸多需要注意的細(xì)節(jié)。根據(jù)我們所積累的經(jīng)驗(yàn),有幾點(diǎn)關(guān)鍵的基本設(shè)計(jì)原則可供大家參考:確定抗體的用途新開展一個(gè)研究項(xiàng)目,弄清楚所感興趣的蛋白的一些基本特性是很有必要的,特別是如果知道蛋白的結(jié)構(gòu)會(huì)對(duì)選擇抗體易于接觸和識(shí)別的區(qū)域有很大的幫助。然而,在沒(méi)有這樣的結(jié)構(gòu)信息的情況下,了解研究的用途會(huì)影響多肽設(shè)
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