化工儀器網(wǎng)首頁(yè)>資訊中心>行業(yè)百態(tài)>正文

藥品質(zhì)量檢測(cè)方法：薄層色譜法
2022年08月24日 11:53:39 來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 作者：小王 點(diǎn)擊量：8663

薄層色譜法是一種以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對(duì)混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的層析分離技術(shù)，能夠快速分離諸如脂肪酸、類(lèi)固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質(zhì)，因此自50年代發(fā)展起來(lái)之后，一直被應(yīng)用在生物研究、藥物研究、環(huán)境化學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。

　　【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】薄層色譜法是一種以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對(duì)混合樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的層析分離技術(shù)，能夠快速分離諸如脂肪酸、類(lèi)固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質(zhì)，因此自50年代發(fā)展起來(lái)之后，一直被應(yīng)用在生物研究、藥物研究、環(huán)境化學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。
 
　　從技術(shù)本身優(yōu)勢(shì)來(lái)說(shuō)，薄層色譜法對(duì)被分離物質(zhì)的性質(zhì)沒(méi)有限制，因此使用范圍較廣。并且平面薄層具有多路柱效應(yīng)，因此理論上可以進(jìn)行多個(gè)樣品的分離。與此同時(shí)，得力于現(xiàn)代技術(shù)以及相關(guān)儀器的進(jìn)步，在儀器化、自動(dòng)化的今天，薄層色譜的分辨率及重現(xiàn)性也得到了了顯著提升。
 
　　準(zhǔn)備工作
 
　　薄層色譜法需要要準(zhǔn)備薄層板(按支持物的材質(zhì)分為玻璃板、塑料板或鋁板等；按固定相種類(lèi)分為硅膠薄層板、鍵合硅膠板、微晶纖維素薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等；按固定相粒徑大小分為10~40µm普通薄層板和5~10µm高效薄層板)、點(diǎn)樣器(一般釆用微升毛細(xì)管或手動(dòng)、半自動(dòng)、全自動(dòng)點(diǎn)樣器材)、展開(kāi)容器(上行展開(kāi)一般用適合薄層板大小的專(zhuān)用平底或雙槽展開(kāi)缸，展開(kāi)時(shí)須能密閉；水平展開(kāi)用專(zhuān)用的水平展開(kāi)槽)、顯色裝置、檢視裝置。
 
　　薄層板制備
 
　　需要注意的是，市售薄層板與自制薄層板的準(zhǔn)備工作并不相同。市售薄層板臨用前一般應(yīng)在 110℃ 活化 30 分鐘(聚酰胺薄膜不需活化)。如在存放期間被空氣中雜質(zhì)污染，使用前可以用三氯甲烷、甲醇或二者的混合溶劑在展開(kāi)缸中上行展開(kāi)預(yù)洗、晾干后，再進(jìn)行活化，并置干燥器中備用。其中，鋁基片薄層板、塑料薄層板可根據(jù)需要剪裁，但須注意剪裁后的薄層板底邊的固定相層不得有破損。
 
　　而自制薄層板操作就較為復(fù)雜了。除另有規(guī)定外，首先將 1 份固定相和 3 份水(或加有黏合劑的水溶液，如 0.2%~0.5%羥甲基纖維素鈉水溶液，或?yàn)橐?guī)定濃度的改性劑溶液)在研缽中按同一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中。然后，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為 0.2~0.3mm)，完成后取下涂好薄層的玻板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干后，在 110℃ 烘 30 分鐘，隨即置于有干燥劑的干燥箱中備用。需要注意的是，自制薄層板使用前需檢查其均勻度，方法是在反射光及透視光下檢視，確保表面應(yīng)均勻、平整、光滑，并且無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染。
 
　　點(diǎn)樣與展開(kāi)
 
　　點(diǎn)樣無(wú)特殊規(guī)定需在潔凈干燥的環(huán)境中進(jìn)行，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上。一般為圓點(diǎn)狀或窄細(xì)的條帶狀，點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊 10~15mm，高效板一般基線(xiàn)離底邊 8~10mm。圓點(diǎn)狀直徑一般不大于 4mm，高效板一般不大于 2mm。接觸點(diǎn)樣時(shí)注意勿損傷薄層表面。條帶狀寬度一般為 5~10mm，高效板條帶寬度一般為 4~8mm，可用專(zhuān)用半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器械噴霧法點(diǎn)樣。點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以相鄰斑點(diǎn)互不干擾為宜，一般不少于 8mm，高效板供試品間隔不少于 5mm。
 
　　之后將點(diǎn)好供試品的薄層板放入展開(kāi)缸中，浸入展開(kāi)劑的深度為距原點(diǎn) 5mm 為宜，密閉保存，待溶劑前沿達(dá)到規(guī)定的展距，取出薄層板并晾干。需要注意的是，展開(kāi)前如需要溶劑蒸氣預(yù)平衡，可在展開(kāi)缸中加入適量的展開(kāi)劑后密閉，一般保持 15~30 分鐘即可。當(dāng)溶劑蒸氣預(yù)平衡后，應(yīng)迅速放入載有供試品的薄層板并立即密閉。如需使展開(kāi)缸達(dá)到溶劑蒸氣飽和的狀態(tài)，則須在展開(kāi)缸的內(nèi)壁貼與展開(kāi)缸高、寬同樣大小的濾紙，一端浸入展開(kāi)劑中，密閉一定時(shí)間，使溶劑蒸氣達(dá)到飽和再如法展開(kāi)。
 
　　顯色與檢視
 
　　一般情況下，有顏色的物質(zhì)可以再在可見(jiàn)光環(huán)境下直接檢視，無(wú)色物質(zhì)則需先進(jìn)行顯色。顯色依據(jù)物質(zhì)不同采取的方法也不同，一般采用噴霧法或浸漬法佐以顯色劑或者直接通過(guò)加熱顯色來(lái)實(shí)現(xiàn)。另外，如果物質(zhì)帶有熒光或顯色后可激發(fā)產(chǎn)生熒光，可以借助紫外光燈(365nm 或 254nm)來(lái)完成熒光斑點(diǎn)觀察的工作，對(duì)于在紫外光下有吸收的成分，可用帶有熒光劑的薄層板(如硅膠 GF254 板)，在紫外光燈(254nm)下觀察熒光板面上的熒光物質(zhì)淬滅形成的斑點(diǎn)。
 
　　系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
 
　　按各品種項(xiàng)下要求對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，即用供試品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)符合規(guī)定的要求。
 
　　鑒別
 
　　鑒別的過(guò)程一般通過(guò)對(duì)比供試品色譜圖中所顯斑點(diǎn)的位置和顏色(或熒光)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖的斑點(diǎn)一致性來(lái)實(shí)現(xiàn)，必要時(shí)化學(xué)藥品可采用供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液混合點(diǎn)樣、展開(kāi)，與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相應(yīng)斑點(diǎn)應(yīng)為單一、緊密斑點(diǎn)。除此之外，還可以通過(guò)薄層色譜掃描儀進(jìn)行掃描來(lái)實(shí)現(xiàn)鑒別、檢查或含量測(cè)定的工作。具體來(lái)說(shuō)即用一定波長(zhǎng)的光照射在薄層板上，對(duì)薄層色譜中可吸收紫外光或可見(jiàn)光的斑點(diǎn)，或經(jīng)激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，然后將掃描得到的圖譜及積分?jǐn)?shù)據(jù)用于鑒別、檢查或含量測(cè)定。
關(guān)鍵詞

相關(guān)閱讀 Related Reading

查看更多+

  • 預(yù)算184萬(wàn)元 常州環(huán)境監(jiān)測(cè)中心采購(gòu)環(huán)境監(jiān)測(cè)儀器

    近日，常州環(huán)境監(jiān)測(cè)中心委托江蘇中冠工程咨詢(xún)有限公司組織公開(kāi)招標(biāo)，采購(gòu)液相色譜儀、熒光光度計(jì)等儀器設(shè)備，預(yù)算184萬(wàn)元。
    2025-06-27 09:05:46

  • 預(yù)算1433萬(wàn)元 廣東海洋大學(xué)采購(gòu)一批儀器設(shè)備

    廣東海洋大學(xué)就“廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院設(shè)備更新項(xiàng)目”發(fā)布招標(biāo)文件，預(yù)算1433.8萬(wàn)元。
    2025-06-27 09:04:57

  • 預(yù)算871.3萬(wàn)元 天津市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心采購(gòu)應(yīng)急監(jiān)測(cè)儀器

    近日，天津市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心委托天津市政府采購(gòu)中心組織公開(kāi)招標(biāo)，為實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急監(jiān)測(cè)保障項(xiàng)目采購(gòu)便攜式氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀、離子色譜儀等...
    2025-06-27 08:53:15

  • 寧夏投資近7800萬(wàn)元升級(jí)食品檢測(cè)能力 筑牢食品安全防線(xiàn)

    寧夏回族自治區(qū)發(fā)展改革委于6月24日正式批復(fù)總投資近7800萬(wàn)元的寧夏食品檢測(cè)研究院食品安全監(jiān)管基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)項(xiàng)目。該項(xiàng)目將更新增配...
    2025-06-27 08:41:38

  • 精智未來(lái)完成Pre-A輪融資 加速呼氣檢測(cè)技術(shù)落地

    精智未來(lái)公司（ChromX）近日成功完成由廣州數(shù)科產(chǎn)投獨(dú)家戰(zhàn)略投資的 Pre-A Ⅲ輪融資，資金將用于拓展微型氣相色譜儀生產(chǎn)能力、...
    2025-06-26 14:36:16

  • 錦西石化氣相色譜分析儀中標(biāo)結(jié)果公告

    項(xiàng)目名稱(chēng)：錦西石化氣相色譜分析儀，項(xiàng)目編號(hào)：0720-2540zbzx0075/02，招標(biāo)范圍：氣相色譜分析儀 數(shù)量：2 套，招標(biāo)...
    2025-06-26 14:25:11

版權(quán)與免責(zé)聲明

  • ①凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其他方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • ②本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • ③如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
科研助力 儀器優(yōu)選——化工儀器網(wǎng)夏季儀器采購(gòu)節(jié)
關(guān)閉