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室溫密封

1.有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。
2.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

一年

顯微鏡

1. 石蠟切片
2. 冰凍切片
3. 細(xì)胞

1.顯微鏡
2.移液器
3.吸頭

1. 4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如需脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹(shù)膠或其它封片劑。
2. 如樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無(wú)水乙醇以及二甲苯。

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

1. 次使用本試劑時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
2. 染色時(shí)間根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
3. 若染色較淺，可延長(zhǎng)染色時(shí)間或重復(fù)染色一次。
4. 若染色較深，可延長(zhǎng)水洗時(shí)間或再重復(fù)梯度脫水一次。

1. 樣品處理
石蠟切片：
二甲苯中脫蠟10-15分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟10-15分鐘。
無(wú)水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
30%乙醇2分鐘。
蒸餾水2分鐘。


冰凍切片：
回溫后的切片蒸餾水30秒-1分鐘。


培養(yǎng)細(xì)胞：
用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。
蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。

2. 伊紅染色
上述處理好的樣品：
用蒸餾水浸潤(rùn)組織1-2分鐘，確保蒸餾水覆蓋整個(gè)組織，使水分均勻分布。
伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。
70%乙醇洗滌2次后即可直接觀察或者繼續(xù)按后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明、封片。
脫水，透明，封片后鏡檢。
如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行伊紅染色。

顯微鏡下觀察，細(xì)胞漿呈紅色。

3. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
脫水、透明、封片：
95%乙醇脫水2分鐘。
換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。
二甲苯透明5分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。
用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。

其它染色：
如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后：
70％乙醇洗滌2次，每次2分鐘。
PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。
然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。