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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>普通試劑> RT-PCR技術(shù)服務(wù)

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RT-PCR技術(shù)服務(wù)

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海研謹生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2025/2/17 9:21:36
  • 訪問次數(shù) 8429

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   公司承接各種實驗代做外包服務(wù):石蠟包埋、免疫組化、HE染色、PAS染色、DNA提取、RNA提取、探針、SNP檢測、WBEMSA、CCK8檢測、細胞凋亡、細胞周期檢測、流式、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、ROS活性氧檢測、線粒體膜電位檢測、平板克隆、軟瓊脂克隆、細胞劃痕、細胞粘附,并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的高*_端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測,ELISA試劑盒(免費代測)、生化試劑盒、分析標準品、對照品、標準物質(zhì)、食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑、細胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測、環(huán)境測試機構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。


主營:

1生化試劑標準品對照品、標準物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒

3.細胞:*細胞、國產(chǎn)腫瘤細胞、國產(chǎn)正常細胞、腫瘤耐藥細胞

4.食品安全檢測試劑、動物疫病類檢測產(chǎn)品獸藥殘留檢測試劑

5.耗材:常用實驗耗材、移液器


各種實驗代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細胞檢測,食品安全檢測試劑,獸藥殘留檢測試劑,動物疫病類檢測,銷售高品質(zhì)標準品,對照品,ELISA試劑盒,細胞,血清,等等

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)

反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse transcriptase PCR,RT-PCR)是一種從RNA擴增cDNA拷貝的方法。RT-PCR對于獲得與克隆mRNA的5’、3’末端序列和從非常少量的mRNA樣品構(gòu)建大容量的cDNA文庫方面都是極為靈敏與通用的方法。此外,RT-PCR還易于鑒定已轉(zhuǎn)錄序列是否發(fā)生突變及呈現(xiàn)多態(tài)性,還可用于測定基因表達的強度。我公司采用二步RT-PCR法,可滿足客戶不同的實驗要求。
樣品要求:提供的樣品要新鮮并盡可能多,不推薦提供RNA樣品,或者提供cDNA,并盡可能詳細的提供背景資料(基因序列、Genebank accession number擴增產(chǎn)物的用途等)。


RT-PCR技術(shù)服務(wù)?基本步驟:
● 模板制備:見RNA提取技術(shù)服務(wù)。
● 引物設(shè)計
    客戶提供上、下游引物,或者我公司提供免費的引物設(shè)計及合成(包括RT-PCR半定量檢測中的內(nèi)參引物)。
● 反轉(zhuǎn)錄
(1)Microtube管中配制下列模板RNA/引物混合液,全量<15 μl。

 

 試劑名稱  使用量
 模板RNA  2μg
 Oligo(dT)12-18 Primer(50μM)  2.5μl

(2)70℃保溫5分鐘后迅速在冰上急冷2分鐘以上。 
(3)離心數(shù)秒鐘使模板RNA/引物的變性溶液聚集于Microtube管底部。 
(4)在上述Microtube管中配制下列反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液。

 

 試劑名稱  使用量
 上述模板RNA/引物變性溶液  
 5×M-MLV Buffer  5μl
 dNTP Mixture(各10 mM)  1.25μl
 RNase Inhibitor(40 U/μl )  25U
 M-MLV(200 U/μl )  200U 
 RNase free dH2O  up to 25μl

42℃保溫1小時。 
(5)70℃保溫15分鐘后冰上冷卻,得到cDNA溶液。
若需要表達,參考基因表達服務(wù)。若需要進行RT-PCR半定量分析,接著以下的操作。
● RT-PCR半定量分析
PCR擴增目的基因及看家基因,產(chǎn)物經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳后進行灰度掃描分析。

RNA模板的制備需另收費(見RNA提取服務(wù))以上為1個目的基因的報價。進行相對定量分析時,同一材料的多個目的基因的價格=1個目的基因價格×目的基因個數(shù)。
提供結(jié)果
完整的實驗操作步驟、電泳圖、定量分析結(jié)果等。

RT-PCR技術(shù)服務(wù)參照:

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