葡聚糖凝膠 G-75 Ｇ型葡聚糖凝膠

葡聚糖凝膠 G-75 Ｇ型葡聚糖凝膠

Sephadex G-75葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 適用于蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠是一種珠狀的交聯(lián)葡聚糖，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。

Sephadex G-75葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 適用于蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠 G-75 Ｇ型葡聚糖凝膠使用的方法：

1. 乙醇浸泡：

在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無鹽水浸泡：

室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時(shí)，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后；

3. 鹽酸浸泡：

在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時(shí)，間隙攪拌，濾干，水洗至中性；

4. 將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；

5. 上樣前平衡層析柱至少3-5 個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer 的PH值）；

6. 凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20% 的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm 以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1 即可；

7. 洗脫方法：

可以用無鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化；

8. 在位清洗（CIP）

凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

產(chǎn)品名稱：                                               英文名稱：
葡聚糖凝膠 LH-20                                    Sephadax LH-20 
葡聚糖凝膠 G-10                                      Sephadex G-10
葡聚糖凝膠 G-25                                      Sephadex G-25
葡聚糖凝膠 G-50                                      Sephadex G-50
葡聚糖凝膠 G-75                                      Sephadex G-75
葡聚糖凝膠 G-100                                    Sephadex G-100