BY-0630 LLC小鼠肺癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0630
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/21 12:09:49
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LLC小鼠肺癌細胞系
LLC小鼠肺癌細胞系是研究肺癌發(fā)生發(fā)展及治療策略的經(jīng)典模型，以高成瘤率、強侵襲轉(zhuǎn)移能力及攜帶 Kras 突變?yōu)楹诵奶卣?，在肺癌增殖機制、轉(zhuǎn)移路徑及hua療藥物篩選中應(yīng)用廣泛，為解析肺癌惡性生物學(xué)行為提供了可靠實驗載體。
來源與背景：該細胞系源自 C57BL/6 小鼠自發(fā)產(chǎn)生的肺腺癌組織，于 20 世紀 70 年代建立。在臨床肺癌中，約 25% 的非小細胞肺癌患者攜帶 Kras 突變，這類腫瘤往往對靶向治療響應(yīng)率低、預(yù)后較差。LLC 細胞系因天然攜帶 Kras G12C 突變，與人類肺腺癌的分子特征高度吻合，彌補了其他肺癌模型在 Kras 突變研究中的不足。作為可直接用于同源小鼠接種的肺癌模型，其體內(nèi)成瘤特性與臨床肺癌進展過程相似，至今仍是肺癌在體實驗研究的shou選細胞系之一。
細胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征，貼壁生長時呈多邊形或短梭形，細胞質(zhì)豐富，細胞核大而不規(guī)則，核仁明顯，核質(zhì)比約 1:1.3，可見多核細胞（約 10%），體現(xiàn)肺癌細胞的惡性形態(tài)。核心特性包括：強成瘤與轉(zhuǎn)移能力，體外培養(yǎng)倍增時間約 24-30 小時，克隆形成率達 65%，C57BL/6 小鼠皮下接種 1×10?細胞后，7 天成瘤率 100%，21 天腫瘤體積可達 1.8cm3；尾靜脈注射后肺轉(zhuǎn)移率達 85%，常伴隨胸腔積液形成，模擬臨床肺癌轉(zhuǎn)移特征。分子特征明確，攜帶 Kras G12C 突變，導(dǎo)致 Ras/MAPK 通路持續(xù)激活，磷酸化 ERK 水平是正常肺上皮細胞的 4 倍；同時高表達 VEGF 和 MMP-9，分別是正常細胞的 3.2 倍和 2.8 倍，為腫瘤血管生成和侵襲提供分子基礎(chǔ)。傳代時用常規(guī)消化液處理 3-4 分鐘，傳代比例 1:4-1:6，連續(xù)傳代 50 次后仍保持 Kras 突變及成瘤能力，遺傳穩(wěn)定性良好。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞密度維持在 30%-70%，當(dāng)密度超過 80% 時，細胞會出現(xiàn)接觸抑制，增殖速率下降 25%。對血清質(zhì)量敏感，低質(zhì)量血清會使細胞凋亡率從 5% 升至 20%，建議使用經(jīng)熱滅活的胎牛血清。傳代時避免過度消化，以免影響細胞活性；凍存采用 90% 血清 + 10% DMSO 的凍存液，程序降溫后液氮保存，復(fù)蘇后 24 小時貼壁率達 90%，48 小時可wan全恢復(fù)增殖活性。
檢測鑒定：經(jīng)微生物篩查，無支原體、細菌、真菌污染，符合實驗細胞質(zhì)量標準。免疫組化顯示細胞角蛋白（CK）陽性、TTF-1 弱陽性，符合肺腺癌表型?；驕y序證實存在 Kras G12C 突變，無 EGFR、ALK 等其他驅(qū)動基因突變，與 30% 的人類肺腺癌患者分子特征一致。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型（眾數(shù) 64-66），存在 12 號染色體三體（含 Kras 基因區(qū)域）等異常，與臨床肺癌染色體改變模式相符。功能驗證中，裸鼠皮下接種后形成的腫瘤組織病理形態(tài)與人類肺腺癌高度相似，免疫組化顯示 Ki-67 陽性率達 70%，證實其高增殖活性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在 Kras 通路機制研究中，通過該細胞系發(fā)現(xiàn) Kras 突變可激活下游 PI3K/Akt 通路，抑制該通路可使細胞增殖率下降 60%，為 “Kras-PI3K/Akt” 軸在肺癌中的作用提供直接證據(jù)。在轉(zhuǎn)移機制研究中，利用其尾靜脈注射肺轉(zhuǎn)移模型，發(fā)現(xiàn)沉默 Twist1 基因可使肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)量減少 75%，揭示上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在肺癌轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵作用。在藥物研發(fā)方面，作為 Kras 抑制劑篩選模型，新型 Kras G12C 抑制劑可使 LLC 細胞增殖抑制率達 70%，并使裸鼠移植瘤體積縮小 65%。此外，該細胞系可用于腫瘤微環(huán)境研究，發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細胞分泌的 IL-6 可使 LLC 細胞侵襲能力增強 2.3 倍，為靶向腫瘤微環(huán)境的聯(lián)合治療提供實驗基礎(chǔ)。
與其他肺癌細胞系相比，LLC 細胞系的優(yōu)勢在于其 Kras 突變的穩(wěn)定性、高成瘤率及與同源小鼠的遺傳相容性，能精準模擬臨床 Kras 突變型肺癌的惡性行為。通過對該細胞系的研究，已闡明 10 個與肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的關(guān)鍵基因，推動 4 種 Kras 靶向藥物進入臨床前試驗，為 Kras 突變型肺癌的精準治療提供了重要實驗依據(jù)。
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