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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>細(xì)胞生物學(xué)試劑>細(xì)胞系>BY-1424 PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞系

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BY-1424 PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞系

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  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) BY-1424
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/7/31 12:54:38
  • 訪問(wèn)次數(shù) 232

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PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞系
PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞系PIEC 細(xì)胞系是從豬髖動(dòng)脈血管內(nèi)皮分離建立的上皮樣細(xì)胞系,因保留血管內(nèi)皮的特異性表型與功能,成為血管生物學(xué)研究、血栓形成機(jī)制解析及豬源病原體感染研究的核心模型。其與豬動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的基因同源性達(dá) 96%,在血管生成、凝血功能模擬上表現(xiàn)突出,為解析血管疾病發(fā)病機(jī)制、開(kāi)發(fā)抗血栓藥物提供了接近在體狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),尤其在動(dòng)脈粥樣硬化、豬瘟病毒血管嗜性研究中具有不可替代的價(jià)值。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來(lái)源與建立背景

PIEC 細(xì)胞系源自 1985 年我國(guó)學(xué)者從健康豬髖動(dòng)脈分離的原代內(nèi)皮細(xì)胞,經(jīng)連續(xù)傳代獲得永生化表型(“PIEC” 代表豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮來(lái)源)。該細(xì)胞系因能穩(wěn)定表達(dá)血管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物,1990 年被確立為血管內(nèi)皮研究的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系,解決了原代血管內(nèi)皮細(xì)胞體外存活時(shí)間短、培養(yǎng)難度大的問(wèn)題,成為首ge能模擬動(dòng)脈內(nèi)皮功能的豬源細(xì)胞系。
  1. 形態(tài)與生長(zhǎng)特征

細(xì)胞呈典型內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài),貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈多邊形,排列呈 “鵝卵石” 樣,胞質(zhì)透亮,可見(jiàn)明顯的血管腔樣結(jié)構(gòu),細(xì)胞核呈橢圓形(核質(zhì)比約 1:4),核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,倍增時(shí)間約 36-40 小時(shí)(稍慢于 MPK 細(xì)胞),傳代比例 1:3 至 1:5,每周換液 2 次以維持細(xì)胞融合度在 60%-70%。細(xì)胞凍存復(fù)蘇存活率超 85%,連續(xù)傳代 180 次后仍保持穩(wěn)定核型(38 條染色體),內(nèi)皮功能標(biāo)志物表達(dá)無(wú)顯著下降,適合長(zhǎng)期功能實(shí)驗(yàn)。
  1. 功能特性

  • 內(nèi)皮標(biāo)志物與功能蛋白:高表達(dá)血管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物,如 CD31(陽(yáng)性率 98%)、血管性血友病因子(vWF,陽(yáng)性率 95%),其 vWF 分泌量達(dá) 8μg/10?細(xì)胞 / 天,顯著高于 MPK 細(xì)胞;同時(shí)表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 2(VEGFR2,陽(yáng)性率 92%)和凝xue酶原激活物抑制劑 1(PAI-1),具備完整的血管舒張、凝血調(diào)節(jié)功能,能模擬動(dòng)脈內(nèi)皮的生理狀態(tài)。

  • 血管生成與屏障功能:在 Matrigel 基質(zhì)上 24 小時(shí)內(nèi)可形成完整的管狀結(jié)構(gòu),管腔形成率達(dá) 90%(顯著高于其他內(nèi)皮細(xì)胞系),且能響應(yīng) VEGF 誘導(dǎo)發(fā)生遷移(遷移速率達(dá) 25μm / 小時(shí)),模擬動(dòng)脈新生血管形成過(guò)程;體外構(gòu)建的內(nèi)皮屏障跨上皮電阻(TEER)值達(dá) 200Ω?cm2,接近體內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)皮的屏障功能。

  • 病原體敏感性:對(duì)豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒等具有高度敏感性,豬瘟病毒感染后 48 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(細(xì)胞間隙增大、脫落),病毒滴度達(dá) 10? TCID??/mL,且病毒可通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞擴(kuò)散,模擬病毒在體內(nèi)的血管播散過(guò)程。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 血管疾病機(jī)制研究

  • 動(dòng)脈粥樣硬化模型:在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)下,PIEC 細(xì)胞的細(xì)胞間黏附分子 1(ICAM-1)表達(dá)量提升 5 倍,單核細(xì)胞黏附率增加 4 倍,同時(shí)膽gu醇沉積明顯,模擬動(dòng)脈粥樣硬化的早期病理變化,為解析疾病發(fā)生機(jī)制提供關(guān)鍵模型。

  • 血栓形成機(jī)制解析:通過(guò) PIEC 細(xì)胞研究凝血系統(tǒng)與內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用,發(fā)現(xiàn)凝xue酶可使細(xì)胞表面 PAI-1 表達(dá)提升 3 倍,抑制纖溶系統(tǒng)活性,證實(shí)內(nèi)皮細(xì)胞在血栓形成中的調(diào)節(jié)作用,為抗血栓藥物研發(fā)提供靶點(diǎn)。

  1. 抗病毒研究與疫苗開(kāi)發(fā)

  • 病毒血管嗜性研究:利用其對(duì)豬瘟病毒的敏感性,發(fā)現(xiàn)病毒通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面的硫酸乙酰肝素進(jìn)入細(xì)胞,感染后可使內(nèi)皮細(xì)胞屏障通透性增加 60%,揭示豬瘟病毒導(dǎo)致血管出血的分子機(jī)制。

  • 疫苗效力評(píng)價(jià):作為豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗的效力檢測(cè)細(xì)胞系,其病毒中和試驗(yàn)結(jié)果與仔豬攻毒保護(hù)率一致性達(dá) 88%,較其他細(xì)胞系提升 15%,被多家疫苗企業(yè)用于批次質(zhì)量控制。

  1. 藥物研發(fā)與安全性評(píng)價(jià)

  • 抗血管生成藥物篩選:基于其血管生成特性建立高通量藥物篩選體系,日均可檢測(cè) 150 種化合物。篩選出的新型抑制劑可使管狀結(jié)構(gòu)形成率下降 70%,VEGFR2 磷酸化水平降低 80%,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示其能抑制動(dòng)脈新生血管形成,為腫瘤抗血管zhi療提供候選藥物。

  • 血管毒性評(píng)價(jià):用于評(píng)估藥物對(duì)動(dòng)脈內(nèi)皮的損傷,某hua療藥物在該模型中的半數(shù)毒性濃度(TC??)與豬體內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)皮損傷劑量相關(guān)性達(dá) 85%,顯著高于 MPK 細(xì)胞系,為藥物血管毒性早期評(píng)價(jià)提供可靠工具。

三、培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4;為促進(jìn)血管生成功能,可添加 20ng/mL VEGF,使 VEGFR2 表達(dá)量提升 30%。

  • 傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 70% 時(shí),消化處理后按 1:4 比例接種,離心速度 800rpm,24 小時(shí)貼壁率超 90%,避免過(guò)度融合(>80% 會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮功能下降)。

  • 凍存保護(hù):采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基,細(xì)胞密度 1.5×10?個(gè) /mL,程序降溫至 - 80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮,復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘,接種至預(yù)涂明膠的培養(yǎng)瓶,存活率可達(dá) 85%。

  1. 功能實(shí)驗(yàn)操作

  • 血管生成檢測(cè):細(xì)胞以 5×10?個(gè) / 孔接種至 Matrigel 包被的 24 孔板,培養(yǎng) 6 小時(shí)后開(kāi)始形成管狀結(jié)構(gòu),24 小時(shí)通過(guò) ImageJ 軟件定量分析管腔長(zhǎng)度與分支點(diǎn)數(shù),結(jié)果變異系數(shù)<10%。

  • 屏障功能檢測(cè):使用 Transwell 小室構(gòu)建單層內(nèi)皮屏障,培養(yǎng) 72 小時(shí)后通過(guò) Millicell ERS-2 測(cè)定 TEER 值,或檢測(cè)熒光標(biāo)記右旋糖酐的通透性,評(píng)估屏障完整性。

四、優(yōu)勢(shì)與局yi
  • 優(yōu)勢(shì)

  1. 動(dòng)脈內(nèi)皮特異性:是唯yi能穩(wěn)定模擬豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮功能的細(xì)胞系,血管生成與凝血調(diào)節(jié)功能顯著優(yōu)于 MPK 等細(xì)胞系,為動(dòng)脈血管疾病研究提供專屬模型。

  1. 功能完整性:保留完整的血管內(nèi)皮生理功能,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生理相關(guān)性高,被國(guó)際血管生物學(xué)協(xié)會(huì)列為推薦細(xì)胞系。

  1. 病原體研究?jī)r(jià)值:對(duì)多種豬源病毒的敏感性高,能模擬病毒在血管內(nèi)皮中的感染過(guò)程,研究結(jié)果的臨床參考價(jià)值高。

  • 局限性

  1. 培養(yǎng)要求高:對(duì)培養(yǎng)表面(如明膠包被)依賴性強(qiáng),培養(yǎng)成本是 MPK 細(xì)胞的 1.2 倍,不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

  1. 血管類型局限:源自髖動(dòng)脈,對(duì)靜脈內(nèi)皮功能的模擬有限,需與靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系配合使用。

  1. 傳代穩(wěn)定性差:連續(xù)傳代超過(guò) 100 代后血管生成能力下降 20%,需嚴(yán)格控制傳代次數(shù)以保持功能穩(wěn)定。

五、研究意義與展望
PIEC 細(xì)胞系的建立為血管內(nèi)皮研究提供了關(guān)鍵工具,其在動(dòng)脈粥樣硬化、病毒血管嗜性研究中的應(yīng)用,推動(dòng)了人類對(duì)血管疾病與病毒感染機(jī)制的認(rèn)知。未來(lái),通過(guò)基因編輯技術(shù)引入人類特異性基因(如凝xue因子),可提升其在人類疾病研究中的適用性;結(jié)合微流控技術(shù)構(gòu)建 “血管芯片” 模型,有望模擬體內(nèi)復(fù)雜的血管微環(huán)境,為精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)研究提供更強(qiáng)大的平臺(tái)。作為豬源動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的代表,PIEC 與 MPK 等細(xì)胞系形成互補(bǔ),共同推動(dòng)豬源細(xì)胞模型在醫(yī)學(xué)與獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展。

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