BY-0350 NCI-N87 N87人胃癌細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
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- 型號(hào) BY-0350
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- 更新時(shí)間 2025/7/17 17:40:44
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NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞系
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞系是研究 HER2 陽(yáng)性胃癌的核心模型，以高表達(dá) HER2 蛋白、攜帶 TP53 突變及對(duì) HER2 靶向藥物敏感為顯著特征，在胃癌 HER2 信號(hào)通路機(jī)制、靶向治療響應(yīng)及耐藥研究中應(yīng)用廣泛，為解析 HER2 陽(yáng)性胃癌的惡性生物學(xué)行為及治療策略提供了可靠實(shí)驗(yàn)載體。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1985 年從一名 67 歲男性胃癌患者的腹腔轉(zhuǎn)移灶中分離建立，屬于彌漫型胃癌亞型。在胃癌患者中，HER2 陽(yáng)性病例約占 15%-20%，這類患者的腫瘤侵襲性強(qiáng)，預(yù)后相對(duì)較差。與其他胃癌細(xì)胞系（如 MKN-45）相比，NCI-N87 因穩(wěn)定高表達(dá) HER2，成為研究 HER2 靶向治療的理想模型。作為國(guó)際上首ge被證實(shí)對(duì)曲妥zhu單抗敏感的胃癌細(xì)胞系，其建立填bu了 HER2 陽(yáng)性胃癌研究模型的空白，至今仍是胃癌 HER2 靶向治療基礎(chǔ)研究與藥物研發(fā)的關(guān)鍵工具。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征，貼壁生長(zhǎng)且排列松散，細(xì)胞呈多邊形或短梭形，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見空泡結(jié)構(gòu)，細(xì)胞核大而畸形，核仁明顯，核質(zhì)比約 1:1.2，具有轉(zhuǎn)移灶胃癌細(xì)胞的惡性形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為HER2 高表達(dá)，免疫組化顯示 HER2 陽(yáng)性率達(dá) 90%，Western blot 檢測(cè)顯示 HER2 蛋白表達(dá)量是正常胃上皮細(xì)胞的 8-10 倍，且存在 HER2 基因擴(kuò)增（拷貝數(shù)≥6），與約 18% 的 HER2 陽(yáng)性胃癌患者一致；TP53 功能缺陷，攜帶 TP53 R273H 突變，導(dǎo)致 p53 通路失活，DNA 損傷修復(fù)能力下降 55%；增殖與藥敏特性，體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 40-48 小時(shí)，克隆形成率約 50%，對(duì)曲妥zhu單抗敏感，IC50 值約為 0.6μg/ml，聯(lián)合hua療藥物shun鉑時(shí)抑制率從單獨(dú)用藥的 50% 提升至 75%。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因貼壁中等，需消化 3-4 分鐘，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 50 次后仍保持 HER2 高表達(dá)及藥敏特性。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌劑及 2mM 谷an酰胺，培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細(xì)胞密度維持在 20%-70%，過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致 HER2 表達(dá)量下降 15%，且增殖速率降低 30%。對(duì)血清中生長(zhǎng)因子敏感，EGF 可使磷酸化 HER2 水平升高 2.3 倍，而曲妥zhu單抗可wan全阻斷該效應(yīng)。傳代時(shí)用含血清培養(yǎng)基終止消化，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，梯度降溫凍存后，復(fù)蘇存活率可達(dá) 85% 以上，24 小時(shí)貼壁率超過(guò) 90%，細(xì)胞功能恢復(fù)正常。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)顯示 HER2（3+）、CK18 陽(yáng)性，CEA 弱陽(yáng)性，符合腺胃癌表型?；驕y(cè)序證實(shí) TP53 R273H 突變及 HER2 基因擴(kuò)增，無(wú) EGFR、ALK 等其他驅(qū)動(dòng)基因突變。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型，存在 17 號(hào)染色體長(zhǎng)臂擴(kuò)增（含 HER2 基因區(qū)域）、8 號(hào)染色體三體等異常，與 60% 的 HER2 陽(yáng)性胃癌患者遺傳學(xué)改變吻合。功能驗(yàn)證中，曲妥zhu單抗處理后，細(xì)胞周期 G1 期阻滯率達(dá) 60%，凋亡率提升至 35%，證實(shí) HER2 靶向治療的有效性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在 HER2 信號(hào)機(jī)制研究中，揭示 HER2 通過(guò)激活 PI3K/Akt 通路促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制該通路可使 NCI-N87 細(xì)胞增殖率下降 60%，為 “HER2-PI3K/Akt” 軸在胃癌中的作用提供直接證據(jù)。在耐藥機(jī)制研究中，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期用曲妥zhu單抗可誘導(dǎo)耐藥，耐藥細(xì)胞中 MET 基因擴(kuò)增上調(diào) 2 倍，聯(lián)合 MET 抑制劑可恢復(fù)敏感性，該發(fā)現(xiàn)已用于臨床聯(lián)合用藥試驗(yàn)。在藥物研發(fā)方面，作為篩選新型 HER2 靶向藥物的模型，近期發(fā)現(xiàn)一種雙特異性抗 HER2 抗體可使細(xì)胞 HER2 內(nèi)吞率提升 40%，抑制效果優(yōu)于曲妥zhu單抗。此外，該細(xì)胞系可用于胃癌腹膜轉(zhuǎn)移研究，裸鼠腹腔接種后腹水形成率 80%，腹膜種植結(jié)節(jié)數(shù)達(dá) 15±3 個(gè)，為轉(zhuǎn)移微環(huán)境研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
與其他胃癌細(xì)胞系相比，NCI-N87 的優(yōu)勢(shì)在于其穩(wěn)定的 HER2 高表達(dá)及靶向藥物敏感性，能精準(zhǔn)模擬 HER2 陽(yáng)性胃癌的臨床特征。通過(guò)該細(xì)胞系的研究，已推動(dòng) 3 種 HER2 靶向藥物進(jìn)入臨床前試驗(yàn)，為 HER2 陽(yáng)性胃癌的精準(zhǔn)治療提供了關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)依據(jù)，持續(xù)促進(jìn)胃癌靶向治療研究的發(fā)展。
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