96T 腦鈉肽（BNP）ELISA 試劑盒
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- 公司名稱 杭州浩仁生物科技有限公司
- 品牌
- 型號 96T
- 產地 國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2017/7/12 2:26:48
- 訪問次數(shù) 779
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注冊號：浙食藥監(jiān)械（準）字2007第2400281
腦鈉肽（BNP）ELISA 試劑盒說明書
一、適用范圍：
腦鈉肽（BNP）ELISA試劑盒應用于定量檢測血清中腦鈉肽（brain natriuretic peptide,BNP）的水平，臨床上可適用于無癥狀心衰（NYHAⅠ級）的早期診斷，監(jiān)測心衰病程的發(fā)展和療效觀察及鑒別心源性和非心源性的呼吸困難。
二、方法原理：
腦鈉肽（BNP） ELISA試劑盒用夾心式ELISA來檢測人血清中的BNP。待測樣品或標準加入抗BNP抗體包被的酶標板微孔內，過氧化物酶交聯(lián)劑再加入孔中，孵育，洗板后，加入過氧化物酶底物/顯色液，反應一段時間后，每孔加入酶反應終止液，使顏色變黃色，顏色強度與BNP含量成比例。用酶標儀在波長450nm處測出吸光度（OD值）。樣品中BNP濃度根據(jù)建立的標準曲線計算。
三、試劑盒組成：（貯藏于2-8°C）
酶標板Coated Wells 96wells 交聯(lián)劑 （Conjugate） 12ml
濃縮洗滌液5XWashing Concentrate 30ml 標準品Standards 1set
底物TMB溶液（TMB Substrate） 11ml 樣品稀釋液Sample Diluent 50ml
終止液Stop Solution 10ml
注：標準品已經1:1000稀釋。
四、樣品采集和處理：
1.用無菌靜脈采血程序采集的新鮮血清和正確保存的血清可用于本試劑盒上。不需添加任何抗凝劑或進行預處理。避免使用溶血標本，脂質標本或微生物污染的血清。
2.室溫（20－25℃）下保存標本不要超過8小時。2－10℃保存血清，不超過48小時。如耽擱的時間更長，請在-20℃或更低的溫度下保存標本。標本避免多次凍融，這樣可能會損失抗體活性，產生錯誤結果。
五、試劑配制：
1.濃縮洗滌液5X用雙蒸水稀釋成1X至150ml。
2.樣品應作1:1000稀釋，即5ul樣品加入245ul樣品稀釋液中，混勻1:50；然后取10ul混合液加入190ul樣品稀釋液中，混勻1:20。標準品已經稀釋，不用再稀釋。
六、操作步驟：
試劑盒應平衡至室溫（20-25C ）再試驗，取出所需反應板。
1.加入10ul標準品Standards、10ul已稀釋血清于相應反應板孔中。
2.每孔加入100ul交聯(lián)劑溶液。輕輕混勻30秒，封住板孔，室溫溫育 45分鐘。
3.洗板：甩盡板內液體，用洗滌液洗滌反應板（每孔內加入350ul洗滌液），并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；反復洗滌5次。
4.每孔加入100ul顯色液， 輕輕混勻10秒，室溫溫育20分鐘。
5.每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；15分鐘內在450nm處讀OD值。
七、結果計算：
手工測繪：將已知濃度的對數(shù)值為X軸，相應的OD值的對數(shù)值為Y軸。肽的濃度與相應的OD值成比例。根據(jù)樣品的在Y軸上OD值的對數(shù)值，畫一條與標準品曲線相交的水平線，在相交點上畫一條垂直線。垂直線與X軸的相交，交點數(shù)值為a，則10a為未知樣品的濃度。
八、質量指標：
靈敏度：10pg/ml
特異性：>92％ using a 100 pg/mL cutoff
重現(xiàn)性：（CV％）
批內：≤10.0％
批間：≤19.8％
檢測范圍（pg/ml）：10-500
回收率（％）：91.0-108.4
九、需要但未提供的材料：
1. 可在450nm處進行讀數(shù)的酶標儀；
2. 能精確吸取10-200µL的移液器；
3. 可調多道（8）移液器（50－200µL）；
4. 供可調多道移液器使用的試劑存放槽；
5. 洗瓶或洗板機；
6. 蒸餾水或去離子水；
7. 1升的圓柱形量筒；
8. 移液器槍頭；
9. 紙巾；
10. 計時器，用以監(jiān)控溫育步驟；
11. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）。
十、注意事項：
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產品。
10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
十一、結果判定（建議）：
小于100pg/ml可排除心衰。
十二、參考文獻：
1. 楊海波,唐元升,朱興雷,黃振文. 再灌注治療對急性心肌梗死患者血漿腦鈉尿肽和左心室重塑的影響[J]. 中國動脈硬化雜志,2004,06.
2. 曹興建,郭新榮,管耘園. 血漿B型鈉尿肽測定在心功能衰竭診斷中的應用[J]. 臨床檢驗雜志,2005,02.
3. Wieczorek SJ,et al, A rapid brain natriuretic peptide assay accuray diagnoses left ventricular dysfunction and heart failure: a multicenter evalution. Am Heart J,2002,1445:834-839.
4. Masel A,Brain natriuretic peptide levels:A potential novel “white count” for congestive heart failure. J Cardiac Failure,2001,7:183-193.
轉載請說明信息來源:
http://www.99inf.com/info_view_129336.shtml
腦鈉肽（BNP）ELISA 試劑盒說明書
一、適用范圍：
腦鈉肽（BNP）ELISA試劑盒應用于定量檢測血清中腦鈉肽（brain natriuretic peptide,BNP）的水平，臨床上可適用于無癥狀心衰（NYHAⅠ級）的早期診斷，監(jiān)測心衰病程的發(fā)展和療效觀察及鑒別心源性和非心源性的呼吸困難。
二、方法原理：
腦鈉肽（BNP） ELISA試劑盒用夾心式ELISA來檢測人血清中的BNP。待測樣品或標準加入抗BNP抗體包被的酶標板微孔內，過氧化物酶交聯(lián)劑再加入孔中，孵育，洗板后，加入過氧化物酶底物/顯色液，反應一段時間后，每孔加入酶反應終止液，使顏色變黃色，顏色強度與BNP含量成比例。用酶標儀在波長450nm處測出吸光度（OD值）。樣品中BNP濃度根據(jù)建立的標準曲線計算。
三、試劑盒組成：（貯藏于2-8°C）
酶標板Coated Wells 96wells 交聯(lián)劑 （Conjugate） 12ml
濃縮洗滌液5XWashing Concentrate 30ml 標準品Standards 1set
底物TMB溶液（TMB Substrate） 11ml 樣品稀釋液Sample Diluent 50ml
終止液Stop Solution 10ml
注：標準品已經1:1000稀釋。
四、樣品采集和處理：
1.用無菌靜脈采血程序采集的新鮮血清和正確保存的血清可用于本試劑盒上。不需添加任何抗凝劑或進行預處理。避免使用溶血標本，脂質標本或微生物污染的血清。
2.室溫（20－25℃）下保存標本不要超過8小時。2－10℃保存血清，不超過48小時。如耽擱的時間更長，請在-20℃或更低的溫度下保存標本。標本避免多次凍融，這樣可能會損失抗體活性，產生錯誤結果。
五、試劑配制：
1.濃縮洗滌液5X用雙蒸水稀釋成1X至150ml。
2.樣品應作1:1000稀釋，即5ul樣品加入245ul樣品稀釋液中，混勻1:50；然后取10ul混合液加入190ul樣品稀釋液中，混勻1:20。標準品已經稀釋，不用再稀釋。
六、操作步驟：
試劑盒應平衡至室溫（20-25C ）再試驗，取出所需反應板。
1.加入10ul標準品Standards、10ul已稀釋血清于相應反應板孔中。
2.每孔加入100ul交聯(lián)劑溶液。輕輕混勻30秒，封住板孔，室溫溫育 45分鐘。
3.洗板：甩盡板內液體，用洗滌液洗滌反應板（每孔內加入350ul洗滌液），并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；反復洗滌5次。
4.每孔加入100ul顯色液， 輕輕混勻10秒，室溫溫育20分鐘。
5.每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；15分鐘內在450nm處讀OD值。
七、結果計算：
手工測繪：將已知濃度的對數(shù)值為X軸，相應的OD值的對數(shù)值為Y軸。肽的濃度與相應的OD值成比例。根據(jù)樣品的在Y軸上OD值的對數(shù)值，畫一條與標準品曲線相交的水平線，在相交點上畫一條垂直線。垂直線與X軸的相交，交點數(shù)值為a，則10a為未知樣品的濃度。
八、質量指標：
靈敏度：10pg/ml
特異性：>92％ using a 100 pg/mL cutoff
重現(xiàn)性：（CV％）
批內：≤10.0％
批間：≤19.8％
檢測范圍（pg/ml）：10-500
回收率（％）：91.0-108.4
九、需要但未提供的材料：
1. 可在450nm處進行讀數(shù)的酶標儀；
2. 能精確吸取10-200µL的移液器；
3. 可調多道（8）移液器（50－200µL）；
4. 供可調多道移液器使用的試劑存放槽；
5. 洗瓶或洗板機；
6. 蒸餾水或去離子水；
7. 1升的圓柱形量筒；
8. 移液器槍頭；
9. 紙巾；
10. 計時器，用以監(jiān)控溫育步驟；
11. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）。
十、注意事項：
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產品。
10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
十一、結果判定（建議）：
小于100pg/ml可排除心衰。
十二、參考文獻：
1. 楊海波,唐元升,朱興雷,黃振文. 再灌注治療對急性心肌梗死患者血漿腦鈉尿肽和左心室重塑的影響[J]. 中國動脈硬化雜志,2004,06.
2. 曹興建,郭新榮,管耘園. 血漿B型鈉尿肽測定在心功能衰竭診斷中的應用[J]. 臨床檢驗雜志,2005,02.
3. Wieczorek SJ,et al, A rapid brain natriuretic peptide assay accuray diagnoses left ventricular dysfunction and heart failure: a multicenter evalution. Am Heart J,2002,1445:834-839.
4. Masel A,Brain natriuretic peptide levels:A potential novel “white count” for congestive heart failure. J Cardiac Failure,2001,7:183-193.
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