侖昌碩 人白細(xì)胞介素25（IL-25）elisa試劑盒

人白細(xì)胞介素25（IL-25）elisa試劑盒

白細(xì)胞介素-18(IL-18)是一種重要的細(xì)胞因子,它能作用于I型輔助性T細(xì)胞(Th1),并在IL-12的協(xié)同作用下能強(qiáng)烈誘導(dǎo)其產(chǎn)生IFN-γ。近來研究表明:IL-18具有廣泛的生物學(xué)活性,在介導(dǎo)細(xì)胞免疫、抵抗微生物感染和抗腫瘤方面起著重要的作用。因此,IL-18在臨床上可作為免疫增強(qiáng)劑、抗微生物或抗腫瘤制劑得以應(yīng)用。到目前為止,國內(nèi)外已有人、小鼠、猴、豬、牛和羊等種屬的IL-18商品化制劑及其相應(yīng)的單克隆抗體(McAb)或多克隆抗體(PcAb)以及夾心ELISA試劑盒的商品化供應(yīng)。然而,有關(guān)馬IL-18(EIL-18)的研究較少且相對滯后,迄今為止,還未見有可供商品化的EIL-18和抗EIL-18 McAb或PcAb及其夾心ELISA試劑盒等相關(guān)產(chǎn)品。 本研究采用RT-PCR從經(jīng)ConA刺激的馬外周血單核細(xì)胞(PBMCs)中擴(kuò)增獲得編碼EIL-18前體蛋白(precursor EIL-18,pEIL-18)的DNA,然后克隆至載體pMD18-T中,鑒定正確的重組質(zhì)粒命名為pMD-EIL-18。自pMD-EIL-18中分別擴(kuò)增pEIL-18及其成熟蛋白(mature EIL-18,mEIL-18)基因,并將其亞克隆至原核表達(dá)載體pET-28a(+)和pET-26b(+)中,重組質(zhì)粒鑒定正確后命名為pET-pEIL-18、pET-EIL-18和pET-mEIL-18。然后分別轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受態(tài)BL21(DE3)中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE分析,結(jié)果表明所得到重組蛋白分別約為25kD、20kD和18kD,經(jīng)Western-blot淺低溫體外循環(huán)(CPB)心臟不停跳手術(shù)對患者機(jī)體T淋巴細(xì)胞IL-4、IFN-r的影響及臨床意義。方法選取45例5～64歲體外循環(huán)心臟直視手術(shù)患者,分為不停跳與停跳體外循環(huán)手術(shù)組。淺低溫心臟不停跳組23例,在體外循環(huán)心臟不停跳下手術(shù),鼻咽溫度保持在31～34℃;低溫心臟停跳組22例,在體外循環(huán)心臟停跳下手術(shù),鼻咽溫度為25～28℃。采用酶標(biāo)分析儀,使用人白細(xì)胞介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)、人r干擾素(IFN-r)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒,分別檢測兩組患者術(shù)前24h、術(shù)后0.5h、術(shù)后24h、術(shù)后7d血清中T淋巴細(xì)胞白細(xì)胞介素4(IL-4)、r干擾素(IFN-r)的含量。結(jié)果心臟不停跳組:T淋巴細(xì)胞IL-4在術(shù)后0.5h、術(shù)后24h升高,術(shù)后7d下降;IFN-r在術(shù)后0.5h、術(shù)后24h升高,術(shù)后7d下降至術(shù)前,變化差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。心臟停跳組:T淋巴細(xì)胞IL-4在術(shù)后0.5h升高(P<0.05),術(shù)后24h明顯升高,術(shù)后7d下降,仍高于術(shù)前,變化均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);IFN-r在術(shù)后0.5h升高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),術(shù)后24h明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),術(shù)后7d下降,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論體外循環(huán)(CPB)心內(nèi)直視手術(shù)中,CPB引起T淋巴細(xì)胞IL-4、IFN-r升高,可導(dǎo)致Th1/Th2平衡變化,在CPB創(chuàng)傷、炎性反應(yīng)中可能起重要作用,而淺低溫不停跳體外循環(huán)(CPB)手術(shù)對IL-4、IFN-r影響小,人白細(xì)胞介素25（IL-25）elisa試劑盒