侖昌碩 人白細(xì)胞介素27（IL-27）elisa試劑盒

人白細(xì)胞介素27（IL-27）elisa試劑盒

白細(xì)胞介素 (interleukin ,IL)是由多種免疫細(xì)胞 (活化的T 細(xì)胞 ,淋巴細(xì)胞 ,單核細(xì)胞等 )分泌的一類細(xì)胞因子 ,它們?cè)诿庖叻磻?yīng)的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用 ,對(duì)治療疾病有著重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。到目前為止 ,人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了 2 7種白細(xì)胞介素。有些新成員能與其受體相互作用后引起一系列生理變化 ,如生長(zhǎng)、增殖、分化和凋亡等 ,如IL 2 4 ,2 5和 2 7,而IL 2 6的生理功能還不太清楚。IL 2 4作為基因藥物抑制腫瘤生長(zhǎng) ,顯示了*的臨床應(yīng)用前景。為了建立人白細(xì)胞介素-35 (IL-35) 的定量ELISA檢測(cè)方法,RT-PCR 克隆了人IL-35的IL-27EBI3亞基和IL-12p35亞基的編碼基因,在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了2個(gè)亞基的高效表達(dá).以大腸桿菌表達(dá)的IL-27EBI3和IL-12p35重組蛋白作為免疫原,免疫BaLb/c小鼠,選取陽(yáng)性血清小鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞融合,用間接ELISA和有限稀釋法進(jìn)行單克隆雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆,獲得了穩(wěn)定分泌抗IL-27EBI3和抗IL-12p35單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株.在效價(jià)測(cè)定和特異性鑒定的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步篩選出一株能穩(wěn)定分泌抗IL-27EBI3單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株3B11和一株能穩(wěn)定分泌抗IL-12p35 單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株3A10,亞類鑒定兩株單抗均為IgG1.應(yīng)用單抗3B11和3A10建立了IL-35雙抗夾心定量ELISA檢測(cè)方法,借助生物素-親和素放大效應(yīng),該方法檢測(cè)IL-35線性范圍為3.12–200 pg/mL,低檢測(cè)限為1.26 pg/mL,與多種其他抗原的交叉反應(yīng)率為0.1%,批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (RSD) 為5.1%–5.6%,批間RSD為5.6%–7.2%,添加回收率為89%–103%,達(dá)到定量分析的要求,為進(jìn)一步組裝IL-35定量ELISA檢測(cè)試劑盒打下了基礎(chǔ).

白細(xì)胞介素 (interleukin ,IL)是由多種免疫細(xì)胞 (活化的T 細(xì)胞 ,淋巴細(xì)胞 ,單核細(xì)胞等 )分泌的一類細(xì)胞因子 ,它們?cè)诿庖叻磻?yīng)的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用 ,對(duì)治療疾病有著重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。到目前為止 ,人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了 2 7種白細(xì)胞介素。有些新成員能與其受體相互作用后引起一系列生理變化 ,如生長(zhǎng)、增殖、分化和凋亡等 ,如IL 2 4 ,2 5和 2 7,而IL 2 6的生理功能還不太清楚。IL 2 4作為基因藥物抑制腫瘤生長(zhǎng) ,顯示了*的臨床應(yīng)用前景。人白細(xì)胞介素27（IL-27）elisa試劑盒