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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>生化試劑>其它生化試劑> M-MLV GIII 反轉(zhuǎn)錄酶(三代）

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M-MLV GIII 反轉(zhuǎn)錄酶(三代）

參考價(jià)￥650.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

三代酶M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶

規(guī)格
10000U650.00元9999 件 可售

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北京蘭博利德商貿(mào)有限公司，成立于2007年。 專業(yè)從事生命科學(xué)方面的服務(wù)，為客戶提供試劑、耗材、儀器等產(chǎn)品，主要涵蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、植物學(xué)、免疫學(xué)、免疫診斷、分子診斷等領(lǐng)域。


我公司有一支具有高度專業(yè)化的團(tuán)隊(duì)，主要成員都來(lái)自于生物消耗品行業(yè)的的企業(yè)，有多年的從業(yè)經(jīng)驗(yàn)，可以為客戶提供標(biāo)準(zhǔn)化、專業(yè)化的服務(wù)。同時(shí)，生物行業(yè)的專家為我公司的發(fā)展提供戰(zhàn)略發(fā)展方面的資訊。


蘭博利德的企業(yè)使命 — 助力生物科研，促進(jìn)生物科技發(fā)展！

 

蘭博利德的核心價(jià)值— 誠(chéng)信、共贏、團(tuán)結(jié)、專注！

 

 

 

 

生命科學(xué)產(chǎn)品、生化試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材等

供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) M5124

貨號(hào)：M5124

儲(chǔ)存條件：-20℃

產(chǎn)品組成

組分規(guī)格

規(guī)格

M-MLVGIII Reverse Transcriptase(200U/ul)

50ul

5×M-MLV First Strand Buffer

500ul

0.1M DTT

100ul


產(chǎn)品簡(jiǎn)介

M-MLV GIII Reverse Transcriptase是通過(guò)基因修飾和重組技術(shù)獲得的第三代M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶。該酶相對(duì)于野生型M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶去除了RNase H活性，并大幅提高了熱穩(wěn)定性（the best 反應(yīng)溫度為50℃），從而大大提高了合成first鏈cDNA時(shí)的特異性和長(zhǎng)度（最長(zhǎng)可達(dá)12 kb），增強(qiáng)了對(duì)RNA復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的耐受性。

酶活單位定義

37℃條件下，以Poly(A)-Oligo(dT)為模板/引物，在10 min內(nèi)， 摻入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。

質(zhì)量控制

宿主原性DNA檢測(cè)

無(wú)宿主DNA污染

核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)

將酶液與超螺旋質(zhì)粒DNA在37℃溫育4h，通過(guò)DNA電泳檢測(cè)質(zhì)粒無(wú)變化。

核酸外切酶殘留檢測(cè)

將酶液與雙鏈DNA底物在37℃溫育16h，通過(guò)DNA電泳檢測(cè)雙鏈DNA底物無(wú)變化。

使用方法

質(zhì)粒載體線性化與去磷酸化同步反應(yīng)流程

1. 于冰上配制如下反應(yīng)體系：


試劑

使用量

引物

X ul

Oligo(dT)20

終濃度2.5uM

或隨機(jī)引物

終濃度2.5ng/ul

或基因特異性引物

終濃度0.25uM

模板 RNAa

50 ng~1ug/20ul

5× M-MLV First Strand Buffer

4ul

0.1 M DTT

1ul

M-MLV GIII Reverse Transcriptase (200 U/ul)

1ul

dNTP Mix (10 mM Each)

1ul

（可選）RNase Inhibitor (40 U/ul)

1ul

Nuclease-Free Water

To 20ul


2. 輕柔吸打混勻后，瞬離；a. 推薦使用試劑盒提取的已去除基因組DNA污染的高質(zhì)量RNA作為模板。

3. 若使用Oligo(dT)20或基因特異性引物，50℃溫育30 min；若使用隨機(jī)引物，先25℃溫育5 min，之后50℃溫育30 min；

注：若目的cDNA小于3 kb，溫育時(shí)間可縮短為15 min。

4. 反應(yīng)結(jié)束后，85℃溫育5 min 以終止反應(yīng)；

5. 將獲得的 cDNA 溶液置于冰上，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注：cDNA 溶液置于 -20℃可保存半年；置于 -80℃可長(zhǎng)期儲(chǔ)存





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