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質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

參考價(jià) 2000
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

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成都里來佳諾生物科技有限公司成立于2017年,公司集團(tuán)在成都擁有1500㎡高標(biāo)準(zhǔn)、高環(huán)評的實(shí)驗(yàn)儀器、耗材、試劑展示平臺,是我國西部技術(shù)的供應(yīng)商。成都里來佳諾生物科技有限公司所在的實(shí)驗(yàn)中心已通過環(huán)評審核。成都里來佳諾公司為響應(yīng)國家重點(diǎn)發(fā)展生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的號召,以精良的產(chǎn)品與優(yōu)質(zhì)的服務(wù)盡可能的滿足新藥研發(fā)機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥高校及科研院所的實(shí)際需求。

公司立足于成都,服務(wù)西部,面向全國,為各大生物醫(yī)藥企業(yè)、高等院校、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院等企業(yè)單位提供生命科學(xué)各研究領(lǐng)域所需的儀器、試劑、耗材。

公司現(xiàn)有銷售網(wǎng)絡(luò)遍布全國,分別在蘭州、貴陽、重慶、廣州、昆明、湖南、廣西、江西、湖北等地設(shè)立服務(wù)中心與辦事處,其他省份正在陸續(xù)建立中,有良好的SOP操作規(guī)程和完善的客戶跟蹤服務(wù)系統(tǒng),現(xiàn)已和國內(nèi)180多家單位建立了長期合作關(guān)系,在業(yè)內(nèi)享有良好的聲譽(yù)。

 

 

技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)交流、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)推廣;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;專用化學(xué)產(chǎn)品銷售(不含危險(xiǎn)化學(xué)品);電子、機(jī)械設(shè)備維護(hù)(不含特種設(shè)備),實(shí)驗(yàn)分析儀器銷售;玻璃儀器銷售;儀器儀表銷售。(除依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目外,憑營業(yè)執(zhí)照依法自主開展經(jīng)營活動(dòng))

1)技術(shù)原理:

轉(zhuǎn)染類型:根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,外?/span>DNA導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞又可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染一般是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,存在于游離的載體上,不整合到染色體,在外源DNA導(dǎo)入細(xì)胞1—4天后收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞對轉(zhuǎn)染基因的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制進(jìn)行分析。

而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則需要使外源基因整合于細(xì)胞染色體從而得到穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,通常需要一個(gè)抗生素篩選的過程。

DEAE葡聚糖只能用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,其他方法均可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNARNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中,其應(yīng)用越來越廣泛。

因?yàn)椴煌募?xì)胞在生理代謝及分裂上均存在差異,因此研究者將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的過程中需要選擇不同的方式。目前,將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的方法主要分為三大類:1、脂質(zhì)體(或是脂質(zhì)體替代物)轉(zhuǎn)染;2、電轉(zhuǎn);3、病毒感染。這三種方法互有優(yōu)劣。脂質(zhì)體或是脂質(zhì)體替代物轉(zhuǎn)染操作簡便,價(jià)格低廉,但是對細(xì)胞毒性大。而且,有些細(xì)胞通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率很低;電轉(zhuǎn)操作方便快捷,但是需要專門的儀器,對細(xì)胞損傷也比較大;病毒感染克服了前兩者的劣勢,感染效率高,對細(xì)胞毒性小,但是病毒前期包裝需要大量的時(shí)間和精力 。

服務(wù)項(xiàng)目

規(guī)格

價(jià)格

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

/指標(biāo)

2000.00

備注:不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑。

2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的詳細(xì)介紹

脂質(zhì)體:中性脂質(zhì)(lipid)是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電陽離子脂質(zhì)體(Cationic liposomes)則不同,DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,據(jù)認(rèn)為一個(gè)約5kb的質(zhì)粒會(huì)結(jié)合2-4個(gè)陽離子脂質(zhì)體,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入培養(yǎng)的細(xì)胞。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法始于1987年,這個(gè)方法的出現(xiàn)使得轉(zhuǎn)染效率、轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定性和可重復(fù)性大大提高,并廣為使用。陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性相對較高,對不同的細(xì)胞可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。血清的存在有可能會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率,需要進(jìn)行優(yōu)化。通常轉(zhuǎn)染試劑有不同脂質(zhì)(lipid)和脂質(zhì)體(liposome)混合配方。

非脂質(zhì)體的脂質(zhì)(Non-liposomal lipids):這個(gè)讀著頗為拗口的新一代技術(shù),代表著脂質(zhì)體技術(shù)的未來發(fā)展方向——革新配方成分形成膠束(micellar)結(jié)構(gòu)而非簡單的雙層膜結(jié)構(gòu),令核酸傳遞更有效率而且細(xì)胞毒性也顯著降低

活化的樹狀聚合物(Activated dendrimers):這個(gè)確乎是Qiagen的獨(dú)門配方的Activated dendrimers本來真正屬于納米技術(shù),高度樹狀分枝形成球形結(jié)構(gòu)有著均一的大小和形狀,借助每個(gè)球體無數(shù)活化的氨基末端凝聚在DNA上形成較為致密的結(jié)構(gòu),并吸附在細(xì)胞膜上,經(jīng)過內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞?;罨陌被梢哉{(diào)節(jié)胞內(nèi)融酶體的pH值,抑制降解活性,使得DNA穩(wěn)定存在。轉(zhuǎn)染的效率高,毒性低,可重復(fù)性好。血清的存在能顯著提高轉(zhuǎn)染效率。

多胺和新一代轉(zhuǎn)染介質(zhì):多胺其實(shí)也是氨基多聚物,原理無非基于吸附帶負(fù)電的核酸形成非共價(jià)結(jié)合的復(fù)合物,結(jié)合并穿越同樣帶負(fù)電的細(xì)胞膜。優(yōu)點(diǎn)是可以攜帶較大的分子,而且細(xì)胞毒性也較低,不會(huì)干擾細(xì)胞代謝途徑。新一代轉(zhuǎn)染介質(zhì)并不局限于單一成分,各種不同配方的脂質(zhì)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種各樣的成分,務(wù)求令轉(zhuǎn)染效率更高,操作更方便,細(xì)胞毒性更低。還有的產(chǎn)品將脂質(zhì)偶聯(lián)到細(xì)胞膜特定受體蛋白的配基上,讓受體蛋白更有效率地轉(zhuǎn)運(yùn)DNA或者生物大分子復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞……

顯微注射和基因槍(Biolistic particle delivery):顯微注射和基因槍是更特殊的導(dǎo)入DNA的方式:將DNA沉淀包被在極為微小的金顆粒(閃閃發(fā)光的金珠,gold beads)上,借助高壓基因槍將大分子直接入細(xì)胞,一旦細(xì)胞接受,就會(huì)發(fā)生瞬時(shí)表達(dá)——這種方法多用于活體內(nèi)導(dǎo)入DNA,比如皮膚的DNA免疫。也有用于上皮細(xì)胞原代細(xì)胞的報(bào)告。是利用硅納米顆粒作為基因轉(zhuǎn)染載體。
顯微注射顧名思義就是使用一根超細(xì)針頭將DNA,RNA或蛋白直接注入細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核;整合的機(jī)會(huì)高一些,但適用這種方法的細(xì)胞好像不多,體外受精較為常見。這兩種方法需要的昂貴設(shè)備和相對復(fù)雜的技術(shù),令普通實(shí)驗(yàn)室敬而遠(yuǎn)之。







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