AQUA技術(shù)在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用

AQUA技術(shù)在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)研究不斷走向jīngzhǔn化和定量化的jīntiān，dànbáizhì作為功能性分子的研究價(jià)值愈發(fā)凸顯。無論是探索疾病機(jī)制，還是開發(fā)治療策略，jīngquè掌握dànbáizhì的表達(dá)水平和變化趨勢都是科學(xué)發(fā)現(xiàn)的重要前提。AQUA（Absolute QUAntification）技術(shù)，作為一種以穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽段為基礎(chǔ)的juéduì定量質(zhì)譜方法，近年來在dànbáizhì研究中展現(xiàn)出廣泛而深遠(yuǎn)的應(yīng)用前景。

一、AQUA技術(shù)概述

AQUA技術(shù)本質(zhì)上是基于合成穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽段的juéduì定量方法。通過人工合成一條與目標(biāo)蛋白消化后肽段wánquán同源、但在特定氨基酸處引入同位素標(biāo)簽（如13C、15N等）的“重肽”，作為內(nèi)標(biāo)加入樣本中。由于重肽與內(nèi)源肽在質(zhì)譜中的行為高度一致，研究人員可通過對兩者在MS/MS中信號(hào)強(qiáng)度比值的計(jì)算，得出目標(biāo)蛋白的juéduì含量。AQUA不依賴樣本間對比，而是提供jīngquè的定量結(jié)果，避免了因樣本處理、質(zhì)譜波動(dòng)等因素導(dǎo)致的數(shù)據(jù)偏差。

二、AQUA技術(shù)的關(guān)鍵特性

• 高特異性識(shí)別能力：通過針對性地設(shè)計(jì)用于質(zhì)譜分析的肽段序列，AQUA可實(shí)現(xiàn)對單一蛋白或蛋白家族成員的特異定量；

• 優(yōu)異的靈敏度與準(zhǔn)確性：即使在復(fù)雜的生物樣本（如血漿、組織勻漿等）中，仍能實(shí)現(xiàn)對低豐度蛋白的jīngzhǔn檢測；

• 適用樣本類型廣泛：適用于細(xì)胞、組織、體液等各類樣本，尤其對不適用于代謝標(biāo)記的臨床樣本具有突出優(yōu)勢；

• 良好的可重復(fù)性與量化線性范圍：由于定量基于外源添加的重肽，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性強(qiáng)，適合長期數(shù)據(jù)積累與多批次分析。

這些特性使得AQUA成為一種既可靠又高度可控的dànbáizhì定量方法，特別適用于對結(jié)果精度有較高要求的研究場景。

三、AQUA技術(shù)在dànbáizhì研究中的核心應(yīng)用

AQUA技術(shù)的應(yīng)用貫穿dànbáizhì研究的多個(gè)階段，其價(jià)值遠(yuǎn)不止于簡單的定量，其背后代表的是以定量為中心的研究思維方式。

1、蛋白表達(dá)水平的jīngzhǔn監(jiān)測

在基礎(chǔ)研究中，了解特定蛋白在不同生理狀態(tài)、疾病模型或處理?xiàng)l件下的表達(dá)變化，是揭示其生物學(xué)功能的起點(diǎn)。AQUA提供的juéduì定量信息，有助于研究者構(gòu)建完整的表達(dá)譜圖，為下游機(jī)制研究奠定數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

2、功能蛋白與信號(hào)通路的定量建模

現(xiàn)代dànbáizhì組學(xué)不僅關(guān)注“是否表達(dá)”，更關(guān)注“表達(dá)多少”。通過對功能相關(guān)蛋白的數(shù)量化建模，AQUA可幫助研究者構(gòu)建更真實(shí)的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)，評(píng)估蛋白間調(diào)控關(guān)系的強(qiáng)弱，提升對系統(tǒng)動(dòng)態(tài)行為的理解。

3、特定蛋白亞型和修飾形式的定量解析

對于存在多種剪接形式、翻譯后修飾（如磷酸化、乙?；龋┑牡鞍?，AQUA可通過設(shè)計(jì)特異性肽段，對不同亞型或修飾位點(diǎn)進(jìn)行定量區(qū)分，為研究蛋白功能多樣性和調(diào)控機(jī)制提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。

4、定量驗(yàn)證dànbáizhì組學(xué)篩選結(jié)果

dànbáizhì組學(xué)初篩方法（如DDA、DIA）通常輸出大量候選差異蛋白，但因技術(shù)本身存在定量偏差，需進(jìn)一步驗(yàn)證。AQUA可作為一種高精度驗(yàn)證手段，對篩選結(jié)果進(jìn)行定量確認(rèn)，增強(qiáng)研究結(jié)論的可信度與發(fā)表可能性。

5、數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化與交叉平臺(tái)比較

在多中心研究或跨平臺(tái)分析中，不同質(zhì)譜系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)流程帶來的系統(tǒng)誤差是研究難點(diǎn)之一。AQUA作為“標(biāo)準(zhǔn)參考點(diǎn)”，可以在不同數(shù)據(jù)集之間實(shí)現(xiàn)結(jié)果的可比性，支持更高層級(jí)的整合與分析。

四、技術(shù)應(yīng)用中應(yīng)關(guān)注的幾個(gè)要點(diǎn)

盡管AQUA具備諸多優(yōu)勢，但要實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的數(shù)據(jù)輸出，研究人員在應(yīng)用過程中仍需注意以下幾點(diǎn)：

• 重肽設(shè)計(jì)需jīngzhǔn匹配目標(biāo)蛋白特征區(qū)域，避免與同源蛋白交叉反應(yīng)；

• 樣本處理流程需標(biāo)準(zhǔn)化，以確保外源肽的穩(wěn)定性和均一性；

• 定量模型應(yīng)結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線與內(nèi)標(biāo)效應(yīng)，增強(qiáng)數(shù)據(jù)解釋力；

• 質(zhì)譜平臺(tái)的穩(wěn)定性與靈敏度對定量結(jié)果的可靠性具有直接影響，需保持設(shè)備狀態(tài)良好。

規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程是AQUA應(yīng)用效果的關(guān)鍵保障，也是未來推廣和普及的重要基礎(chǔ)。

隨著dànbáizhì研究不斷向更深層次發(fā)展，定量的需求日益增強(qiáng)，而AQUA技術(shù)憑借其高精度、高特異性和可追溯性，已逐步成為dànbáizhì組學(xué)中的核心定量工具。無論是在基礎(chǔ)機(jī)制研究，還是臨床轉(zhuǎn)化研究中，AQUA所提供的定量維度都為科研人員提供了更堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。作為科研服務(wù)提供者，百泰派克生物科技將持續(xù)關(guān)注定量蛋白組分析的發(fā)展趨勢，致力于為dànbáizhì研究提供前沿技術(shù)支持和zhuānyè服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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