基于PRM的血漿樣本靶向蛋白定量分析

基于PRM的血漿樣本靶向蛋白定量分析檢測技術服務詳情介紹

血漿是dànbáizhì組學研究中zuì具臨床轉化價值的樣本類型之一，因其來源廣泛、獲取便捷且包含豐富的系統(tǒng)性生物學信息。然而，血漿中dànbáizhì濃度動態(tài)范圍可達10^10級別，高豐度蛋白（如白蛋白、免疫球蛋白）占據(jù)總dànbáizhì質量的90%以上，使得低豐度dànbáizhì——尤其是潛在的疾病標志物——難以被準確識別。（Parallel Reaction Monitoring）PRM技術憑借其高選擇性與靈敏度，已成為血漿中低豐度蛋白靶向定量分析的重要工具。本文將系統(tǒng)解析PRM在血漿樣本bǎxiàngdàn白定量分析中的關鍵優(yōu)勢、技術路徑。

一、血漿樣本分析的技術挑戰(zhàn)

1、高動態(tài)范圍抑制效應：高豐度蛋白造成離子抑制，遮蔽低豐度靶標。

2、復雜背景干擾：血漿含有多種干擾成分（如脂類、小分子、糖蛋白），影響質譜分析穩(wěn)定性。

3、重復性要求高：臨床樣本分析需具備jígāo的批次一致性與定量精度。

4、樣本量受限：部分臨床隊列樣本有限，需在微量條件下實現(xiàn)高質量定量。

二、PRM技術在血漿蛋白定量中的適用性

PRM是基于高分辨率質譜平臺的靶向分析技術，適合少量、高復雜樣本中的低豐度蛋白jīngquè定量。

關鍵優(yōu)勢包括：

1、高分辨率 Orbitrap 掃描：有效區(qū)分背景離子與靶標離子，提升信噪比。

2、多碎片離子定量機制：自由選擇響應zuì佳的離子峰進行定量，增強方法魯棒性。

3、與穩(wěn)定同位素內標協(xié)同應用：實現(xiàn)juéduì定量與批間校正，滿足臨床樣本分析需求。

三、血漿樣本PRM分析的標準流程

1、樣本預處理

（1）高豐度蛋白去除：常用的免疫親和柱（如MARS）去除白蛋白/IgG。

（2）蛋白濃度標準化：BCA或Bradford法統(tǒng)一輸入量。

（3）變性還原烷基化：促進酶解效率，提高肽段回收率。

2、酶解與內標添加

（1）使用Trypsin或Lys-C酶進行充分酶解。

（2）在酶解前添加SIL肽段，保證全過程校準能力。

3、肽段純化與富集

（1）C18固相萃取去除鹽和小分子干擾。

（2）可根據(jù)靶標濃度需求加入SISCAPA等親和富集策略。

4、LC-PRM質譜分析

（1）高效液相色譜（NanoLC或μLC）實現(xiàn)分離。

（2）PRM模式參數(shù)優(yōu)化：孤立窗口（1~2 Da）、NCE能量、注入時間等精調。

5、數(shù)據(jù)分析與質量控制

（1）使用Skyline進行碎片離子峰識別、積分與內標校正。

（2）設置QC樣本、空白、反復注入控制系統(tǒng)穩(wěn)定性。

百泰派克生物科技圍繞臨床樣本dànbáizhì組應用場景，建立了高靈敏度、高標準化的血漿PRM定量平臺。

特色優(yōu)勢包括：

1、專屬肽段數(shù)據(jù)庫：覆蓋500+常見疾病相關蛋白靶標，支持快速方法開發(fā)。

2、高通量Orbitrap質譜平臺：支持μg級別樣本輸入，靈敏度達低飛摩爾級。

3、自動化數(shù)據(jù)處理流程：Skyline+Python腳本實現(xiàn)高效率定量與批量質控。

4、富集與去除方案組合化：根據(jù)項目需求匹配高豐度蛋白去除、親和富集、分級分離等策略。

血漿的dànbáizhì組信息具有高度的生物醫(yī)學價值。PRM技術在jīngzhǔn識別與定量低豐度血漿蛋白方面展現(xiàn)出強大優(yōu)勢，特別適合用于標志物驗證、藥物研究及大隊列臨床項目中。百泰派克生物科技將繼續(xù)推動bǎxiàngdàn白定量平臺的發(fā)展，為客戶提供高效、標準化、可重復的血漿dànbáizhì組解決方案。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術*，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

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