PRM技術(shù)在低豐度蛋白質(zhì)定量中的優(yōu)勢與挑

PRM技術(shù)在低豐度蛋白質(zhì)定量中的優(yōu)勢與挑戰(zhàn)檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在dànbáizhì組學研究中，低豐度dànbáizhì的jīngzhǔn定量對于疾病早期標志物發(fā)現(xiàn)、藥物靶點驗證以及復雜信號通路解析至關(guān)重要。然而，常規(guī)數(shù)據(jù)依賴采集（DDA）方法在面對復雜樣本背景和極低豐度目標分子的情況下，往往存在檢測靈敏度不足、重現(xiàn)性差的問題。近年來，PRM技術(shù)（Parallel Reaction Monitoring）因其高選擇性、高重現(xiàn)性和高通量特性，在靶向低豐度dànbáizhì定量分析中受到廣泛關(guān)注。本文將系統(tǒng)解析PRM在低豐度dànbáizhì檢測中的技術(shù)優(yōu)勢與現(xiàn)實挑戰(zhàn)，并分享百泰派克生物科技在該領(lǐng)域的應(yīng)用經(jīng)驗與技術(shù)平臺。

一、PRM技術(shù)概述：從SRM到PRM的演進

PRM技術(shù)是在傳統(tǒng)的選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM/MRM）基礎(chǔ)上發(fā)展而來的高分辨率靶向質(zhì)譜技術(shù)。核心原理是在高分辨Orbitrap或TOF質(zhì)譜儀上，全程監(jiān)測目標肽段的所有碎片離子，提高了定量準確性與特異性。

二、PRM技術(shù)的低豐度dànbáizhì定量優(yōu)勢及挑戰(zhàn)

PRM是一種建立在高分辨率質(zhì)譜平臺（如Orbitrap）基礎(chǔ)上的靶向定量方法，其工作流程包括：通過LC-MS系統(tǒng)選擇特定母離子（precursor），隨后對其所有碎片離子（product ions）進行全掃描采集。在數(shù)據(jù)處理階段，研究者可根據(jù)碎片圖譜自由選擇zuì具代表性的離子用于定量，提高了方法的靈活性與特異性。

1、關(guān)鍵優(yōu)勢包括：

（1）高分辨率與質(zhì)量準確性：Orbitrap系統(tǒng)可提供ppm級質(zhì)量精度，顯著提升目標離子識別能力。

（2）無需預(yù)定義過渡離子：與SRM不同，PRM技術(shù)可后期靈活選擇用于低豐度dànbáizhì定量的碎片，提高分析深度和結(jié)果穩(wěn)健性。

（3）適用于復雜基質(zhì)樣本：高選擇性有助于降低背景干擾，尤其適用于血漿、腦脊液等高動態(tài)范圍樣本。

2、PRM具有天然優(yōu)勢，但在低豐度dànbáizhì定量檢測中仍面臨多重技術(shù)瓶頸：

（1）靶標肽段響應(yīng)性差：部分dànbáizhì肽段本身離子化效率低，易受基質(zhì)抑制，難以形成穩(wěn)定信號。

（2）樣本復雜性干擾檢測：血漿中dànbáizhì濃度跨12個數(shù)量級，目標肽段信號易被高豐度蛋白遮蔽。

（3）方法重現(xiàn)性與線性范圍限制：在飛摩爾（fmol）以下濃度范圍內(nèi)，實現(xiàn)跨批次、跨樣本的穩(wěn)定檢測，需要高度優(yōu)化的分析條件與嚴格質(zhì)控。

（4）數(shù)據(jù)分析復雜度高：盡管Skyline等工具可視化良好，但高質(zhì)量的數(shù)據(jù)解讀仍依賴經(jīng)驗豐富的質(zhì)譜分析人員，尤其在背景干擾明顯時。

百泰派克生物科技集成Orbitrap Exploris 480高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)，結(jié)合深度優(yōu)化的靶向dànbáizhì組學流程，為科研與臨床轉(zhuǎn)化提供靈敏、準確、可重復的PRM定量服務(wù)。百泰派克生物科技集成靶標設(shè)計、方法開發(fā)、樣本處理與數(shù)據(jù)分析全流程能力。我們特別針對低豐度蛋白開發(fā)了高靈敏度PRM定量流程，適用于：

• 疾病相關(guān)生物標志物驗證（如早期腫瘤、神經(jīng)退行性疾?。?/p>

• 藥效評價與機制研究中的靶點動態(tài)追蹤

• 多中心臨床樣本中的標準化PRM分析

PRM技術(shù)為低豐度dànbáizhì定量的高靈敏度檢測提供了可能，尤其在生物標志物驗證與臨床前研究中展現(xiàn)巨大潛力。未來，隨著質(zhì)譜技術(shù)與數(shù)據(jù)算法的進一步融合，PRM將在jīngzhǔn醫(yī)療領(lǐng)域扮演更加核心的角色。百泰派克生物科技將持續(xù)推動這一前沿技術(shù)的應(yīng)用，為生命科學研究注入更多可能。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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