PRM質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)定量中的應(yīng)用與價值

PRM質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)定量中的應(yīng)用與價值解析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

免疫學(xué)方法如ELISA和Western blot雖然廣泛使用，但在特異性、通量和定量準(zhǔn)確性方面存在諸多限制。尤其在面對復(fù)雜生物樣本和低豐度蛋白時，這些方法常常力不從心。因此，研究者亟需一種靈敏度高、重復(fù)性強(qiáng)、定量準(zhǔn)確的技術(shù)，以滿足疾病標(biāo)志物驗證、藥物靶點研究和多中心臨床樣本對比等需求。本文主要對PRM質(zhì)譜技術(shù)在dànbáizhì定量中的應(yīng)用與價值進(jìn)行解析。

一、什么是PRM質(zhì)譜技術(shù)？

PRM是基于高分辨率質(zhì)譜的bǎxiàngdàn白定量技術(shù)，通常運行在如Thermo Fisher Orbitrap等gāoduān質(zhì)譜儀上。它可看作是SRM（Selected Reaction Monitoring）的升級版，在工作流程上類似，但具有更高的特異性和分辨率。PRM通過選中特定的前體離子并對其所有碎片離子進(jìn)行全面掃描，從而獲得完整的MS/MS譜圖，極大提高了靶向定量的可靠性。

二、PRM質(zhì)譜技術(shù)在dànbáizhì定量中的核心優(yōu)勢

1、高特異性

PRM利用高分辨率和高質(zhì)量精度的質(zhì)譜檢測全范圍碎片離子，能有效區(qū)分同位素干擾和背景噪音，尤其適用于復(fù)雜背景下的蛋白檢測。

2、高靈敏度

得益于Orbitrap平臺的強(qiáng)大性能，PRM能夠?qū)崿F(xiàn)對低豐度蛋白的jīngzhǔn捕獲，使其在生物標(biāo)志物驗證等場景中表現(xiàn)出色。

3、高重復(fù)性與可遷移性

相較于SRM依賴于優(yōu)化過的過渡對，PRM減少了方法開發(fā)的主觀依賴性，大幅提升了不同實驗室、不同批次之間的數(shù)據(jù)一致性。

4、簡化的數(shù)據(jù)處理

PRM通過全面的碎片離子信息減少了干擾判斷的難度，搭配如Skyline等軟件平臺，數(shù)據(jù)處理更為直觀高效。

三、PRM質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用場景

1、腫瘤標(biāo)志物驗證

在癌癥研究中，PRM常用于LC-MS/MS發(fā)現(xiàn)候選標(biāo)志物后的驗證階段，具有良好的動態(tài)范圍和重復(fù)性。在多組學(xué)聯(lián)合研究中，PRM常用于對DDA發(fā)現(xiàn)階段篩選出的候選蛋白進(jìn)行驗證。其高通量和高靈敏度特性，使其成為構(gòu)建多標(biāo)志物panel的理想選擇。

2、疾病機(jī)制研究

通過動態(tài)監(jiān)測特定蛋白在疾病進(jìn)程中的表達(dá)變化，輔助解析疾病發(fā)生機(jī)制。如自身免疫病、神經(jīng)退行性疾病等，PRM可以監(jiān)測特定蛋白動態(tài)變化，為病理機(jī)制提供時間維度的分子證據(jù)。

3、生物藥研發(fā)

PRM可用于候選蛋白藥物的表達(dá)水平監(jiān)控、免疫原性檢測等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。PRM在抗體藥物或融合蛋白表達(dá)分析中可實現(xiàn)穩(wěn)定性與純度檢測，亦可用于免疫原性相關(guān)蛋白監(jiān)測，是GMP環(huán)境下的理想工具。

4、臨床樣本對比分析

支持多組織、多時間點、多中心樣本的標(biāo)準(zhǔn)化對比，保障研究結(jié)果的可重復(fù)性。其高度的重復(fù)性和抗干擾能力，使PRM適合在多中心臨床研究中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化、可比性強(qiáng)的蛋白定量，支持生物標(biāo)志物的臨床轉(zhuǎn)化。

盡管PRM優(yōu)勢顯著，其方法開發(fā)和數(shù)據(jù)解析仍需一定zhuānyè積累。例如，選擇合適的肽段和穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)、構(gòu)建可靠的標(biāo)準(zhǔn)曲線、控制儀器參數(shù)等，都是確保實驗成功的關(guān)鍵因素。同時，高通量數(shù)據(jù)的解讀也對生信分析平臺和zhuānyè人員提出更高要求。

百泰派克生物科技PRM解決方案

百泰派克生物科技構(gòu)建了一整套標(biāo)準(zhǔn)化PRM質(zhì)譜平臺，依托Thermo Fisher Orbitrap Exploris系列儀器，聯(lián)合自建的靶標(biāo)蛋白肽段數(shù)據(jù)庫，實現(xiàn)高覆蓋率、高準(zhǔn)確性的定量分析服務(wù)。我們的技術(shù)團(tuán)隊擁有豐富的PRM項目經(jīng)驗，能夠協(xié)助客戶完成從靶點篩選、方法開發(fā)到數(shù)據(jù)分析與結(jié)果解讀的全流程服務(wù)。與此同時，我們的生信分析部門可根據(jù)客戶需求提供可視化報告和深度解讀，提升科研產(chǎn)出效率。

PRM質(zhì)譜技術(shù)以其高特異性、高靈敏度和良好的重復(fù)性，在dànbáizhì定量領(lǐng)域日益展現(xiàn)出重要價值。面對日益復(fù)雜的生命科學(xué)問題，PRM無疑是連接基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用的重要橋梁。百泰派克生物科技將繼續(xù)以*的平臺、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牧鞒毯蛕huānyè的團(tuán)隊，為科研工作者提供jīngzhǔn、可靠的dànbáizhì定量解決方案，加速科學(xué)發(fā)現(xiàn)的每一步。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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