慢病毒包裝
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 廣州艾迪基因科技有限責(zé)任公司
- 品牌 艾迪基因
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/29 18:10:12
- 訪問次數(shù) 17
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▍慢病毒包裝
慢病毒（Lentivirus）是一種特殊的逆轉(zhuǎn)錄病毒，能夠?qū)⑼庠椿蛴行У卣系剿拗魅旧w上，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)。慢病毒載體的優(yōu)勢(shì)包括廣泛的細(xì)胞感染能力、長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)、低免疫原性、大載荷能力以及相對(duì)安全性。這些特性使得慢病毒載體在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床應(yīng)用中具有巨大的應(yīng)用潛力和價(jià)值。
▍服務(wù)詳情
艾迪基因擁有成熟的慢病毒包裝平臺(tái)，可包裝滿足于不同實(shí)驗(yàn)需求的慢病毒。我司采用的慢病毒載體經(jīng)過精心優(yōu)化，使用成熟的慢病毒包裝體系，旨在提高生物安全性、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和基因表達(dá)水平。采用細(xì)胞滴定法檢測(cè)病毒的滴度，以最準(zhǔn)確的檢測(cè)手段確認(rèn)活病毒滴度，有助于下游實(shí)驗(yàn)的開展。
| 服務(wù)類型 | 敲除慢病毒/過表達(dá)慢病毒/干擾慢病毒/文庫(kù)病毒 |
|---|---|
| 交付標(biāo)準(zhǔn) | 1.滴度報(bào)告 2.圖譜 3.慢病毒 |
| 周期 | 快至3周 |
| 價(jià)格 | 過表達(dá)慢病毒： 低至3680元 敲除慢病毒： 1820元/條，5460元（三保一） 干擾慢病毒： 1820元/條，5460元（三保一） |
▍服務(wù)優(yōu)勢(shì)
▍服務(wù)類型
可根據(jù)客戶需求，提供多種類型的慢病毒包裝服務(wù)。
| 敲除慢病毒 | 將CRISPR/Cas9基因敲除系統(tǒng)遞送至細(xì)胞中，實(shí)現(xiàn)目的基因的有效敲除 |
|---|---|
| 過表達(dá)慢病毒 | 將外源基因片段遞送至細(xì)胞中，實(shí)現(xiàn)基因片段高效、穩(wěn)定地表達(dá) |
| 干擾慢病毒 | 將shRNA干擾系統(tǒng)遞送至細(xì)胞中，實(shí)現(xiàn)目的基因長(zhǎng)期、穩(wěn)定地敲降 |
| 文庫(kù)病毒 | 將CRISPR/Cas文庫(kù)遞送至細(xì)胞中，構(gòu)建基因編輯混合細(xì)胞池 |
▍交付標(biāo)準(zhǔn)
| 基因敲除病毒、過表達(dá)病毒、干擾病毒 | CRISPR/Cas9文庫(kù)慢病毒 |
|---|---|
滴度報(bào)告 | 滴度報(bào)告 |
| 質(zhì)粒圖譜 | 質(zhì)粒圖譜 |
操作說明 | 文庫(kù)慢病毒（ ≥1×10^6 TU/mL,交付規(guī)格：1×10^8 TU、5×10^8 TU、1×10^9 TU） |
| 慢病毒（滴度：≥1×106 TU/mL，1 mL） |
▍服務(wù)流程
▍應(yīng)用案例
基因組規(guī)模的 CRISPR-Cas9 敲除和轉(zhuǎn)錄激活篩選
CRISPR-Cas9作為一種強(qiáng)大的遺傳篩選工具，可以用于深入理解基因功能和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，尤其是在疾病相關(guān)的基因研究中具有重要應(yīng)用潛力。為描述如何使用CRISPR-Cas9系統(tǒng)進(jìn)行基因敲除和轉(zhuǎn)錄激活的篩選，Joung等人通過將定制的sgRNA庫(kù)克隆到慢病毒載體、在HEK293FT細(xì)胞中包裝并收集病毒粒子，隨后用于轉(zhuǎn)導(dǎo)目標(biāo)細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了基因組規(guī)模的CRISPR-Cas9敲除和激活篩選，成功鑒定了與特定表型相關(guān)的關(guān)鍵基因。
篩選候選基因中的慢病毒包裝方案
Joung, Julia et al. “Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout and transcriptional activation screening.” Nature protocols vol. 12,4 (2017): 828-863.
▍ FAQ
1、慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)后，細(xì)胞狀態(tài)很差甚至出現(xiàn)大量死亡，如何解決？
細(xì)胞被慢病毒感染后，細(xì)胞狀態(tài)不佳，這種情況有較多可能的因素導(dǎo)致的，以下是一些可能的原因和相應(yīng)的解決方案：
① 病毒滴度過高：高滴度的慢病毒可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性，使細(xì)胞無法正常生長(zhǎng)。解決方案是降低病毒的滴度，進(jìn)行一系列稀釋實(shí)驗(yàn)，找到一個(gè)既能有效轉(zhuǎn)染又不影響細(xì)胞生長(zhǎng)的滴度
② 細(xì)胞狀態(tài)不佳：感染前細(xì)胞的健康狀態(tài)可能影響感染后的生長(zhǎng)。解決方案是確保細(xì)胞在好的狀態(tài)下進(jìn)行感染，例如在感染前24小時(shí)換新鮮培養(yǎng)基，并確保細(xì)胞密度適中
① 病毒滴度過高：高滴度的慢病毒可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性，使細(xì)胞無法正常生長(zhǎng)。解決方案是降低病毒的滴度，進(jìn)行一系列稀釋實(shí)驗(yàn)，找到一個(gè)既能有效轉(zhuǎn)染又不影響細(xì)胞生長(zhǎng)的滴度
② 細(xì)胞狀態(tài)不佳：感染前細(xì)胞的健康狀態(tài)可能影響感染后的生長(zhǎng)。解決方案是確保細(xì)胞在好的狀態(tài)下進(jìn)行感染，例如在感染前24小時(shí)換新鮮培養(yǎng)基，并確保細(xì)胞密度適中
2、為什么選擇慢病毒作為基因傳遞工具？
慢病毒具有很高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和長(zhǎng)期穩(wěn)定的基因表達(dá)能力，特別適合于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。此外，慢病毒能夠?qū)⑼庠椿蛘系剿拗骰蚪M中，保證了長(zhǎng)時(shí)間的基因表達(dá)。
2、什么是慢病毒包裝？
慢病毒是一種將外源基因?qū)爰?xì)胞的基因遞送工具。通過如293T等工具細(xì)胞，將帶有目標(biāo)DNA片段的慢病毒載體包裝成具有細(xì)胞感染活性的慢病毒顆粒。這個(gè)包裝過程包括：構(gòu)建慢病毒載體、準(zhǔn)備包裝質(zhì)粒、工具細(xì)胞培養(yǎng)、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、收集病毒顆粒、病毒顆粒純化和濃縮和滴度測(cè)定等過程。
文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)該產(chǎn)品被引用文獻(xiàn)
▍參考文獻(xiàn)
1 .通過CBLB-OE慢病毒構(gòu)建CBLB過表達(dá)的293T 細(xì)胞
Exploring the role of CBLB in acute myocardial infarction: transcriptomic, microbiomic, and metabolomic analyses
腸道微生物群和代謝物的特定改變與急性心肌梗死（AMI）相關(guān)，CBLB 可能在其中發(fā)揮重要作用。然而，這些相互作用的具體機(jī)制尚未充分研究，導(dǎo)致理解上的重大不足。本研究旨在通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、16S rDNA 和非靶向代謝物分析，探討 CBLB 干預(yù)對(duì) AMI 小鼠的影響。研究團(tuán)隊(duì)采用多組學(xué)綜合策略，包括將 CBLB 慢病毒包裝載體轉(zhuǎn)染入 293T 細(xì)胞，然后對(duì) AMI 小鼠進(jìn)行干預(yù)，并進(jìn)行病理染色、糞便 16S rDNA 測(cè)序和血清非靶向代謝組學(xué)分析。結(jié)果顯示，CBLB 干預(yù)顯著減少了小鼠心臟梗死區(qū)的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和膠原纖維形成，并導(dǎo)致微生物群、代謝物和差異表達(dá)基因（DEGs）的關(guān)鍵變化。這表明 CBLB 在 AMI 調(diào)控中可能起重要作用。研究確認(rèn)了 CBLB 干預(yù)后差異基因、代謝物和微生物群在 AMI 調(diào)控中的潛力，為未來探索 CBLB 的治療應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。
2 . 通過SENP1-shRNA慢病毒構(gòu)建SENP1敲低的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（GSCs）
SENP1-Mediated deSUMOylation Regulates the Tumor Remodeling of Glioma Stem Cells Under Hypoxic Stress
本研究探討 SENP1 介導(dǎo)的去SUMO化在缺氧條件下對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（GSCs）惡性行為的影響及其臨床價(jià)值。缺氧條件下，HIF1α 上調(diào)激活 GSCs 中的 Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路，支持膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）生長(zhǎng)。SENP1 介導(dǎo)的去SUMO化穩(wěn)定 HIF1α 和 β-連環(huán)蛋白的表達(dá)，促進(jìn) GSCs 引發(fā)的腫瘤形成。使用慢病毒包裝的 SENP1 shRNA 下調(diào) GSCs 中的 SENP1 表達(dá)，結(jié)果顯示 GSCs 的增殖和分化減弱，腫瘤發(fā)生減少。HIF1α 誘導(dǎo)的 Wnt/β-連環(huán)蛋白激活依賴于 SENP1 介導(dǎo)的去SUMO化，促進(jìn) GSC 驅(qū)動(dòng)的 GBM 增長(zhǎng)。研究表明，靶向 SENP1 可能有效提高 GBM 的治療效果。
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