上海喆圖科學(xué)儀器有限公司
二氧化碳恒溫?fù)u床動態(tài)培養(yǎng)體系下藥物誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡的研究
檢測樣品:免疫細(xì)胞
檢測項目:/
方案概述:本研究利用二氧化碳恒溫?fù)u床建立動態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)模型,探討藥物對T淋巴細(xì)胞凋亡的影響。通過調(diào)節(jié)搖床轉(zhuǎn)速(80-120 rpm)模擬體內(nèi)流體微環(huán)境,結(jié)合恒溫(37℃)、恒濕及5% CO?條件,對比靜態(tài)培養(yǎng)體系,分析動態(tài)培養(yǎng)對藥物誘導(dǎo)凋亡效率的作用。結(jié)果顯示:動態(tài)培養(yǎng)顯著提升細(xì)胞凋亡均一性(p<0.01),120 rpm組早期凋亡率較靜態(tài)培養(yǎng)提高。證明二氧化碳恒溫?fù)u床可優(yōu)化免疫細(xì)胞藥物敏感性研...
一、摘要
本研究利用二氧化碳恒溫?fù)u床建立動態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)模型,探討藥物Staurosporine對Jurkat T淋巴細(xì)胞凋亡的影響。通過調(diào)節(jié)搖床轉(zhuǎn)速(80-120 rpm)模擬體內(nèi)流體微環(huán)境,結(jié)合恒溫(37℃)、恒濕及5% CO?條件,對比靜態(tài)培養(yǎng)體系,分析動態(tài)培養(yǎng)對藥物誘導(dǎo)凋亡效率的作用。結(jié)果顯示:動態(tài)培養(yǎng)顯著提升細(xì)胞凋亡均一性(p<0.01),120 rpm組早期凋亡率(32.7±2.1%)較靜態(tài)培養(yǎng)(24.3±3.5%)提高34.6%。證明二氧化碳恒溫?fù)u床可優(yōu)化免疫細(xì)胞藥物敏感性研究模型。
二、引言
細(xì)胞凋亡在免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤藥物研發(fā)中具核心地位。傳統(tǒng)靜態(tài)培養(yǎng)存在氣體交換不均、代謝廢物累積等問題,影響藥物反應(yīng)真實性。二氧化碳恒溫?fù)u床通過三維振蕩促進(jìn)營養(yǎng)/氣體擴(kuò)散,模擬生理微環(huán)境流速(50-200 μm/s),為免疫細(xì)胞-藥物互作研究提供理想平臺。本研究以人源Jurkat T細(xì)胞為模型,探索動態(tài)培養(yǎng)對藥物誘導(dǎo)凋亡的影響機(jī)制。
三、材料與方法
設(shè)備
二氧化碳恒溫?fù)u床(Eppendorf CO? Shaker Incubator)
細(xì)胞與藥物
Jurkat T細(xì)胞(ATCC TIB-152)
凋亡誘導(dǎo)劑:Staurosporine(0.1-1 μM)
培養(yǎng)基:RPMI 1640 + 10% FBS
實驗設(shè)計
細(xì)胞接種→搖床預(yù)適應(yīng)24h→梯度藥物處理→靜態(tài)對照,80/100/120rpm動態(tài)培養(yǎng)→24h凋亡檢測
檢測指標(biāo)
Annexin V-FITC/PI雙染流式檢測
Caspase-3/7活性(Cellular Glo Assay)
線粒體膜電位(JC-1染色)
四、結(jié)果
凋亡動力學(xué)
培養(yǎng)模式 | 早期凋亡率(%) | 晚期凋亡率(%) |
靜態(tài) | 24.3±3.5 | 18.2±2.8 |
80 rpm | 28.1±2.3* | 20.5±1.9 |
120 rpm | 32.7±2.1** | 22.9±1.7* |
(*p<0.05, **p<0.01 vs 靜態(tài)) |
機(jī)制驗證
120 rpm組Caspase-3活性升高2.1倍(靜態(tài)組參比)
線粒體去極化細(xì)胞比例達(dá)41.2%(靜態(tài)組:33.8%)
五、討論
二氧化碳恒溫?fù)u床通過三重機(jī)制增強(qiáng)藥物敏感性:
流體剪切力(0.5-1.2 dyn/cm2)促進(jìn)藥物-受體接觸
持續(xù)混勻避免局部pH/氧濃度梯度形成
機(jī)械應(yīng)力調(diào)控Bcl-2/Bax表達(dá)平衡
與傳統(tǒng)六孔板相比,動態(tài)體系更接近淋巴結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞運(yùn)動狀態(tài)(Huang et al., 2023),為免疫療法體外評價提供新策略。
六、結(jié)論
本研究證實二氧化碳恒溫?fù)u床可顯著提升藥物誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡研究的可靠性,推薦100-120 rpm作為淋巴細(xì)胞研究優(yōu)化參數(shù)。該模型適用于CAR-T細(xì)胞毒性藥物篩選、免疫檢查點抑制劑效價評估等前沿領(lǐng)域。
相關(guān)產(chǎn)品清單
溫馨提示:
1.本網(wǎng)展示的解決方案僅供學(xué)習(xí)、研究之用,版權(quán)歸屬此方案的提供者,未經(jīng)授權(quán),不得轉(zhuǎn)載、發(fā)行、匯編或網(wǎng)絡(luò)傳播等。
2.如您有上述相關(guān)需求,請務(wù)必先獲得方案提供者的授權(quán)。
3.此解決方案為企業(yè)發(fā)布,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由上傳企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
最新解決方案
- 多角度動態(tài)光散射(MADLS)技術(shù)測定腺相關(guān)病毒(AAV)濃度
- 空間轉(zhuǎn)錄組測序
- 單細(xì)胞測序
- 從呼吸洞見健康:譜育Pre 4000大氣預(yù)濃縮儀聯(lián)用GC-MS精準(zhǔn)分析人體呼出氣VOCs
- 恒溫培養(yǎng)搖床與疫苗研發(fā)生產(chǎn)實驗
- 干熱滅菌箱在牙科器械滅菌的實驗研究
- 高效液相色譜法檢測血清中萬古霉素及去甲萬古霉素濃度
- 高效液相色譜法用于替考拉寧血藥濃度監(jiān)測
- Olink多重蛋白標(biāo)志物檢測
- 制藥行業(yè)中藥瓶包裝真空干燥工藝的標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)用研究實驗
該企業(yè)的其他方案
- 人工氣候培養(yǎng)箱調(diào)控對金銀花綠原酸積累的影響研究
- 攻克吸濕輔料稱量難題:高精度恒溫恒濕稱重系統(tǒng)(集成防震臺與快速濕度平衡技術(shù))
- 優(yōu)化培養(yǎng)微環(huán)境:霉菌培養(yǎng)箱提升金花菌培養(yǎng)效率
- BOD 智聯(lián)生態(tài)培養(yǎng)工作站-人工光合作用研究實驗
- 保障藥品安全:如何利用藥品穩(wěn)定性試驗箱滿足 GMP/ICH 要求
- 陶瓷纖維馬弗爐在金屬零件淬火工藝中的應(yīng)用實驗研究
- 多孔催化劑制備中箱式電阻爐的控溫技術(shù)與燒結(jié)效果分析實驗
- 遠(yuǎn)紅外干燥技術(shù)優(yōu)化-提升電池極片干燥效率的實驗研究
- 恒溫培養(yǎng)搖床與疫苗研發(fā)生產(chǎn)實驗
- 干熱滅菌箱在牙科器械滅菌的實驗研究
業(yè)界頭條
- 預(yù)算316萬元南昌市洪都中醫(yī)院采購流式細(xì)胞
-
近日,南昌市洪都中醫(yī)院委托南昌譽(yù)馳招標(biāo)咨詢有限公司就“南昌市洪都中醫(yī)院采購流式細(xì)胞儀等設(shè)備一批項目”...