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技術文章

PVDF膜蛋白染色步驟

點擊次數:5854 發(fā)布時間:2012-6-6

一、所需試劑

1. 2%麗春紅S濃貯存液(3-羥基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2,7-萘二磺酸):溶于30%三氯醋酸和30%磺基水楊酸中。貯存液可在室溫下穩(wěn)定存放1年以上。

 

2. PBS。www.runwelltac.com

 

二、操作步驟

 

1. 在染色之前,先配制麗春紅S的應用液。即將2%的麗春紅S濃貯存液用1%醋酸1:10稀釋即成為應用液(注意:如果使用硝酸纖維膜,須將麗春紅S應用液更換為用水1:10稀釋);

 

2. 用麗春紅S應用液將PVDF膜洗1次;

 

3. 加入新鮮稀釋的麗春紅S應用液,并在室溫下攪動5~10min;

 

4. 將PVDF膜放入PBS中漂洗數次,每次1~2min,并更換PBS;

 

5. 根據需要將轉印部位和分子量標準位置進行標記,至此PVDF膜可用于封閉和加入抗體。

 

 

PVDF膜-GE品牌,貨號RPN303F,說明書鏈接:www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1321702883482/msds25006567__ENSaf_20111119125238.pdf

 

PVDF膜-羅氏品牌,貨號3010040001,說明書鏈接:

e-labdoc.roche.com/LFR_PublicDocs/ras/03010040001_en_07.pdf

 

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