生化培養(yǎng)箱的多管發(fā)酵法分享

    生化培養(yǎng)箱適用于環(huán)境保護、衛(wèi)生防疫、藥檢、農畜、水產等科研、院校和生產部門。是水體分析和BOD測定、細菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存、植物栽培、育種試驗的恒溫設備。是生物、遺傳工程、醫(yī)學、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護、農林畜牧等行業(yè)的科研機構、大專院校、生產單位或部門實驗室的重要試驗設備。

  生化培養(yǎng)箱--多管發(fā)酵法
  1．濾膜法
  濾膜是一種微孔性濾膜，孔徑0.45μm。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過濾器中，經過抽濾，細菌即被截留在膜上，然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍色或藍綠色，其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無色。正常情況下，由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用，在M-FC培養(yǎng)基上很少見到非糞大腸菌菌落。

   2．多管發(fā)酵法

   初發(fā)酵實驗  發(fā)酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，并在內倒置有小玻璃管。每個樣品用三個不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五管，將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中，在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。乳糖能起選擇作用，因為很多細菌不能發(fā)酵乳糖，而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產酸產氣。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑，細菌產酸后，培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發(fā)酵管表明試驗陽性，如在倒管內產氣不明顯，可輕拍發(fā)酵管，有小氣泡升起為陽性。
復發(fā)酵實驗  輕微振蕩初發(fā)酵試驗陽性結果的發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉接到EC培養(yǎng)液中，在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來自自然環(huán)境的大腸菌群的生長)。培養(yǎng)后立即觀察，發(fā)酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。