解決方案｜氣相色譜法測定人血白蛋白中的辛酸鈉含量

1.1

氣相色譜儀：GC-2050（FID 檢測器）

1.2

GC 參數(shù)：

色譜柱：

SH-PolarD, 30m x 0.25 mm x 0.25 μm

柱溫程序：恒溫 160°C （15 min）

進(jìn)樣口溫度：230°C

進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比30:1

進(jìn)樣量：1μL

載氣：氮?dú)?/span>

載氣控制方式：恒線速度，40 cm/sec

檢測器：FID

檢測器溫度：250°C

空氣流量：200mL/min

氫氣流量：32mL/min

尾吹氣流量：24mL/min

3.1

辛酸標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖和化合物信息分別見圖1和表1。

3.2

精確量取辛酸及庚酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，加入4mL 三氯甲烷，溶劑揮干后用 0.1 mL 三氯甲烷復(fù)溶，配制成濃度為1500、3000、4500、6000、7500μg/mL 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液；內(nèi)標(biāo)濃度為 3000 μg/mL。以濃度比為橫坐標(biāo)，峰面積比為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性擬合，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)1500 μg/mL標(biāo)樣數(shù)據(jù)，以3倍信噪比計(jì)算各目標(biāo)組分的儀器檢出限，標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖 2，線性相關(guān)系數(shù)、檢出限、分離度及拖尾因子見表2。

3.3

取1500μg/mL 辛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1μL 進(jìn)氣相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，以目標(biāo)物峰面積考察儀器重復(fù)性，結(jié)果如表3。

3.4

配制人血白蛋白樣品至40g/L濃度，按照步驟2進(jìn)行處理后上機(jī)檢測。

計(jì)算方法：辛酸鈉含量（mmol/g 蛋白）=辛酸量（μg）×稀釋倍數(shù)/［ 取樣量（mL）×1000×144.22× 蛋白含量(g/mL)]

儀器測試結(jié)果見表4，樣品色譜圖見圖3。樣品加標(biāo)濃度水平為 0.053 mmol/g，平行制樣三次，平均回收率測試結(jié)果見表4。