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MALDI-TOF——微生物鑒定方法中的一種質(zhì)譜方法

閱讀:3519      發(fā)布時(shí)間:2021-10-25
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微生物鑒定方法多種多樣。如常使用的形態(tài)觀察、 鏡檢、 重要的生化反應(yīng),還有度較高的基因鑒定法。其中,MALDI-TOF方法(基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜),是利用對(duì)核糖體蛋白檢測(cè)及與標(biāo)準(zhǔn)圖庫(kù)比對(duì)的一種質(zhì)譜方法。

該方法檢驗(yàn)原理是:

微生物中分子量在2000-20000Da范圍內(nèi)的核糖體蛋白質(zhì),其表達(dá)基本不受培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、滅活方式以及生長(zhǎng)周期等的影響,屬于保守表達(dá)的蛋白質(zhì),不同種的微生物(甚至亞種)其保守蛋白會(huì)有差異,因此每種微生物有其*的蛋白質(zhì)指紋圖譜(PMF);通過(guò)MALDI-TOF測(cè)得的微生物蛋白質(zhì)指紋圖譜,再與標(biāo)準(zhǔn)庫(kù)里的指紋圖譜進(jìn)行匹配、對(duì)比,從而完成對(duì)微生物快速的鑒定。


除了微生物鑒定外,MALDI-TOF技術(shù)還可應(yīng)用于多種領(lǐng)域,范圍極廣:

1、可疑菌溯源性分析:在檢測(cè)出未知菌時(shí),可自建菌庫(kù),保留菌株圖譜信息,有助日后可疑菌的溯源分析。

2、腫瘤篩查中的運(yùn)用:利用弱陽(yáng)離子磁珠聯(lián)合MALDI-TOF-MS分析腫瘤患者和健康對(duì)照血清蛋白質(zhì)表達(dá)譜,鑒定差異表達(dá)蛋白,建立疾病診斷模型,探索該疾病的發(fā)病機(jī)制。

3、細(xì)菌耐藥性分析:MALDI-TOF MS檢測(cè)細(xì)菌耐藥性的方法主要分為 3 類: 檢測(cè)耐藥菌株的特征性質(zhì)譜峰、細(xì)菌酶活性作用下抗菌藥物的改變和抗菌藥物存在下細(xì)菌生長(zhǎng)情況。

 

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