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上海凱朗儀器設備廠
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培養(yǎng)箱在實驗室設備中的用途
2016-3-11 閱讀(755)
對細胞培養(yǎng)箱所需的實驗室設備的種類和使用建議，也有一定的標準和規(guī)范：細胞培養(yǎng)主要重點在于保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。
1、顯微鏡：倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)*設備，主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等，可隨時拍攝并記錄細胞生長情況。
超凈工作臺：目前絕大部分細胞實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作，具有操作簡單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。超凈工作臺主要有兩種——側流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內空氣經粗過濾器初濾，由離心風機壓入靜壓箱，再經空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū)，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。
2、（1）側流式工作臺：空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側，也有從上向下或從下向上流向對側，形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌，工作臺結構為封閉式；
（2）外流式工作臺：凈化后的空氣面向操作者流動，因而外方氣流不致混入操作，工作臺結構為開放式，但進行有害物質實驗操作對操作者不利。超凈工作臺應需要定期請有關部門檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級，用塵埃粒子計數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應超過3.5個/L；空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s；細菌菌落數(shù)平均<1個，根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器。
3、培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，一般zui適生長溫度為37℃，溫差變化不應超過±0.5℃。溫度升高2℃時，變不利于細胞生存，溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此，可控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是選擇。
?。?）恒溫培養(yǎng)箱：應選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜，其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng)。
?。?）CO2培養(yǎng)箱：目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH，適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時，為使培養(yǎng)瓶內與外界保持通氣狀態(tài)，可將瓶蓋略微旋松，為避免細胞被污染，使用這種培養(yǎng)方式時，培養(yǎng)箱內空氣必須保持清潔，需定期用紫外線照射或酒精消毒，同時培養(yǎng)箱內應放置盛有無菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā)，保持箱內相對濕度在100%。
?。?）細胞培養(yǎng)耗材：培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶，萊貝在本篇不做詳細介紹，這部分知識會在實驗室耗材知識部分作重點介紹。
4、細胞冷凍儲存器：儲存器常用的液氮容器，根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時需要考慮三個因素：容積大小、取放使用方便、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以儲存1ml的安瓿250-15000個左右。液氮溫度zui低文帝可達-196℃，使用時應注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā)，需注意觀察剩余液氮量，及時補充，避免液氮不足使細胞受損或死亡。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇，可配置有電子控制器的液氮儲存器，實現(xiàn)凍存自動化；并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度，確保樣品溫度始終處于設定溫度點；可配置報警系統(tǒng)，設置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報警；同時具備熱氣體旁路系統(tǒng)，防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐，從而更有效地保護樣品，防止容器內升溫。另外，可選擇液氮供應罐通過連接管給儲存罐補充液氮，保證樣品安全。
