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昆蟲多功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒

時間:2019/12/3閱讀:1766
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昆蟲多功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

試劑盒規(guī)格及配置  

 

名稱

96孔配置

48孔配置

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

 

自備物品

①.酶標儀(450nm)

②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

③.37℃恒溫箱

操作步驟

①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

②.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次   (也可用洗板機洗板)。

⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

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