聚合酶鏈式反應酶免吸附分析法（PCR-ELISA）

聚合酶鏈式反應-酶免吸附法（PCR-ELISA）

   聚合鏈式反應（Polymerase Chain Reaction,簡稱PCR）,是用于放大特定的DNA片段,在生物體外復制DNA的分子生物學技術(shù).ELISA是免疫學測定中敏感和特異的檢測方法的代表.PCR-ELISA綜合上述兩方法,成為繼PCR之后靈敏性更高,特異性更強,更省時易行的新檢測方法,并且解決了PCR產(chǎn)物宣的問題,使得PCR在臨床醫(yī)學上得以應用.

   PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)增加的.PCR能將pg=10-⒓g量級的DNA起始待測模板擴增到微克（ug=10-⒍g）水平,能從100萬個細胞中檢測出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個空斑形成單位（Plaque form-ing unit,簡稱PFU）;在細菌的檢測中,即使低至1個細菌的靶DNA也能被檢出.PCR是分子生物學中檢測DNAzui普遍和靈敏的技術(shù).PCR反應擴增出相關(guān)DNA高拷貝數(shù),以前用熒光素（溴化乙錠,簡稱EB）染色凝膠電泳進行檢測,但無法定量.曾有人利用熒光素染色凝膠電泳的掃描照片進行光密度分析,希望通過光密度的變化實現(xiàn)PCR的定量,但由于熒光素染色凝膠電泳本身的檢測結(jié)果不具有特異性,因此光密度分析無法獲得定量的結(jié)果,這使得長期以為,PCR只能獲得相對定量的結(jié)果,無法應用在臨床醫(yī)學上.科技的發(fā)展是相互影響的,酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）的出現(xiàn)啟發(fā)了人們,為PCR的定量開辟了一條新的思路.在PCR擴增以后,利用ELISA的原理和方法,使用酶標抗體,通過免疫吸附,酶促反應產(chǎn)物的分析來實現(xiàn)定量,這樣的新方法被稱為PCR-ELISA.