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貼壁細胞標準換液步驟

時間:2018-12-18閱讀:6822
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貼壁細胞標準換液步驟

 

一、準備工作

1.  廢液缸
2.  吸管
3.  新鮮培養(yǎng)基
4.  油性記號筆/普通簽字筆
5.  實驗記錄本

二、實驗步驟
1.  打開層流,打開層流間和超凈臺的紫外線燈,廢液缸和吸管同時照射;
2.  把水浴鍋調(diào)整到37 并使其穩(wěn)定;
3.  將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液體保持10分鐘,(200ml液體保持15分鐘,500ml液體保持20分鐘),間或搖動;
4.  著無菌服裝,帽子,口罩和手套
5.  用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁,放置到超凈臺上;
6.  將細胞培養(yǎng)瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
7.  用吸管吸棄舊培養(yǎng)基,更換吸管,于非細胞培養(yǎng)面加入新鮮培養(yǎng)基;
8.  記錄實驗過程和細胞培養(yǎng)瓶號。

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