1. 3流式細胞技術檢測法
原理:
包繞著鞘液的單細胞或微粒經(jīng)過流式細胞儀檢測區(qū)域時被激發(fā)光激發(fā)出熒光信號,形成的不同波長熒光信號被光電倍增管接收后轉(zhuǎn)換為電信號并進一步轉(zhuǎn)換成計算機可識別的數(shù)字信號。其應用范圍廣泛,常用于細胞生物學、細胞遺傳學、免疫學、腫瘤學、血液學等領域。
應用:
1)了解細胞大小及顆粒度
2)細胞狀態(tài):pH 值、氧化還原、氧自由基、Ca2+
3)細胞表面蛋白:CD 系列等
4)細胞內(nèi)蛋白:胞內(nèi)因子、P53等
5)細胞功能檢測:細胞周期、凋亡 、分化、細胞增殖活力、吞噬功能、藥物泵的功能
7)免疫表型分析
流程:
1)根據(jù)實驗需要預處理待檢測細胞
2)上機檢測相關參數(shù)
3)對所得結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析
4)細胞分選流程(略)
基礎背景:
l 提供背景資料,包括蛋白的表達位置,如是否膜蛋白或胞漿蛋白等
l 需要檢測的細胞,每種樣本提供的細胞數(shù)量要大于5×105
l 連接有或可連接熒光染料的一抗,并表明來源和應用濃度
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