軟骨染色液（阿利新藍法,pH1.0）的操作方法

   阿利新藍(Alcian)又稱愛先藍或阿爾辛藍等，是一種類銅鈦花青共軛染料，zui初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團結合，也即阿爾辛藍與組織內含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復合物。阿利新藍由中央含銅的酞菁環(huán)與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成，該異硫脲基呈中度堿性，使阿利新藍帶陽離子。pH值為2.5時，組織內的羧基電離，帶有一個負電荷，與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵，使帶有羧基的酸性黏液物質(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH值為1.0時，組織內的硫酸根電離，帶有一個負電荷，與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵，使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質)染色。
  軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)利用染液的不同pH 值可區(qū)分粘液物質的類屬，pH為1時，羧基(COOH)不著色，硫酸基(OSO3H)著色，pH為 2.5 時，羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳，使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白著色。
操作步驟(僅供參考)：
1、常規(guī)脫鈣，二甲苯脫蠟，通過梯度乙醇后，入蒸餾水再水化。
2、入Alcian酸化液浸泡3min。
3、入Alcian染色液染色30min。
4、流水沖洗5min。
5、梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片
注意事項：
1、固定液采用10%中性福爾馬林。
2、該法可區(qū)分鑒別硫酸黏蛋白和蛋白多糖，其pH=1.0。
3、已開封試劑應在開封后6個月內使用完，每次用后應及時擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套
 本試劑僅適用于科研領域，不適用于研究診斷或其他用途。