Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱 

SupelcoDiscoveryRP-Amide色譜柱/Discovery反相酰胺C16液相色譜柱

Supelco Discovery 反相酰胺C16液相色譜柱的主要特點：

• 對極性化合物具有出色的保留能力和分離度 與 C18 柱相比具有*的選擇性

柱效高，峰形良好

疏水性比 C18 柱弱

可兼容 * 的含水流動相

Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱

5 μm  L × I.D. 5 cm × 2.1 mm

5 μm  L × I.D. 10 cm × 2.1 mm 

5 μm  L × I.D. 15 cm × 2.1 mm

5 μm  L × I.D. 5 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 25 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 12.5 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 25 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 5 cm × 4.6 mm

5 μm  L × I.D. 10 cm × 4.6 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 4.6 mm 

5 μm  L × I.D. 25 cm × 4.6 mm

在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質，他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等，

1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在*酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受*純水且對極性化合物保留很好的色譜柱

2. 如果樣品極性太強，或酸性太強;可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否 則很難重復實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)

3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質，且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等)，他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留

4.如果堿性化合物的極性太強，或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單，缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少，價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點 是不能用來分析其它樣品，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱；

液相色譜柱決定終分離效果，所以在選擇色譜柱時候有必要考慮清楚自己的需求。

首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱，正相有SI等，反相有C18等。正相主要分離極性物質，反相主要分離非極性物質，氨基柱等主要分離二者之間的。

明確了色譜柱大概功能之后，確認下自己樣品信息，基本就有點眉目了，方向對了，剩下的事情就是細節(jié)了如：鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

鍵合相：確定了正反相后基本就簡單了，正相很簡單，我們重點討論下反相，C18主要分離非極性和弱極性物質，因為是鍵合硅膠，所以C18也分好幾種有常規(guī)的如C18-A，耐純水的OL Apple C18-AQ、耐酸堿的OL Apple C18-EX等，如果發(fā)現C18保留很弱，調整流動相也不行，這個時候可以考慮C8甚至C4等。

粒徑：色譜法追求的是高效、高分辨、高速等。目前來說亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型，基本具備“三高”特征尤其是高速，線速度不在影響分離度，不過附帶的缺點就是高壓，要升級相應的硬件，成本高昂，需要謹慎考慮。

5um填料普遍，目前來說*可以勝任各種日常檢測，即使有特殊要求，3um色譜填料基本上也能全覆蓋，不過該模型下線速度和分離度是成反比的。

孔徑：目前很多60~300A都有，甚至更高或者更低的。開孔的填料多了個類似分子篩功能，所以選擇孔徑一定要關注分子量，蛋白（分子量5000以上）一般都需要在160A以上，多肽（分子量上限在3000左右）在120A左右，一般快速柱孔徑都很小，可以縮短樣品路徑。所以上還有無孔硅膠柱子，也很適合蛋白分離，*解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問題。

碳載量：快速柱碳載量很低，如A家等，省時間，省溶劑，但分析部分復雜樣品如中藥等有點力不從心，這個時候可以考慮英國OL Apple色譜柱，碳載量15~23%，碳載量數值就像河床的水草，越高代表越密集，保留樣品能力越強，越有可能分離開難分離物質。