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MASP ELISA 技術(shù)：補體系統(tǒng)研究的重要手段
MASP（Mannan - binding lectin - associated serine protease，甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲an酸蛋白酶）ELISA 技術(shù)是針對 MASP 蛋白進行定量檢測的重要方法，在補體系統(tǒng)激活機制、免疫相關(guān)疾病及感染性疾病研究中占據(jù)關(guān)鍵地位。MASP 作為凝集素途徑補體激活的關(guān)鍵酶，參與機體固有免疫防御，其活性及含量變化與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、感染性休克、免疫缺陷病等疾病的病理進程密切相關(guān)。
MASP ELISA 試劑盒通?；陔p抗體夾心原理設(shè)計。核心組分包含預(yù)包被抗 MASP 特異性抗體的微孔板、MASP 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)記檢測抗體、顯色底物（如 TMB）及洗滌緩沖液等。檢測時，將樣本（如血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿）加入預(yù)包被抗體的微孔板，若樣本中存在 MASP，會迅速與固相抗體特異性結(jié)合；隨后加入酶標(biāo)記檢測抗體，形成 “固相抗體 - MASP - 酶標(biāo)抗體" 夾心復(fù)合物。經(jīng)過多次嚴(yán)格洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，添加顯色底物，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中 MASP 含量呈正相關(guān)。最后，通過酶標(biāo)儀在特定波長（如 450nm）下測定吸光度值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，即可精準(zhǔn)計算出樣本中 MASP 的濃度。
樣本處理需遵循嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范。血清樣本采集后室溫靜置 1 - 2 小時，待血液凝固后，以 3000 - 4000 轉(zhuǎn) / 分鐘離心 10 - 15 分鐘取上清；血漿樣本需使用合適抗凝劑（如肝su鈉、EDTA），采集后立即顛倒混勻并離心分離；組織樣本需經(jīng)研磨、勻漿、裂解等步驟，再離心獲取組織勻漿上清；細(xì)胞培養(yǎng)上清可直接離心去除細(xì)胞碎片后備用。若不能及時檢測，所有樣本需分裝保存于 -20℃或 -80℃環(huán)境，防止 MASP 降解或活性改變，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。