微孔板:已預(yù)包被 ROS 特異性抗體,為抗原抗體反應(yīng)提供固相載體。
標(biāo)準(zhǔn)品:一系列已知濃度的 ROS 標(biāo)準(zhǔn)溶液,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以便對樣本中的 ROS 進(jìn)行定量分析。
酶結(jié)合物:酶標(biāo)記的二抗,能夠與結(jié)合了 ROS 的一抗結(jié)合,催化底物顯色。
底物溶液:在酶的作用下發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生可檢測的顏色變化。
洗滌緩沖液:用于去除未結(jié)合的物質(zhì),減少非特異性信號干擾。
終止液:用于終止酶促反應(yīng),使反應(yīng)體系的顏色穩(wěn)定,便于準(zhǔn)確測量吸光度。
樣本準(zhǔn)備:根據(jù)樣本類型(如細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清等)進(jìn)行適當(dāng)處理,確保樣本中的 ROS 處于可檢測狀態(tài)。
加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品和處理好的樣本加入到預(yù)包被的微孔板中,溫育一段時間,使 ROS 與抗體充分結(jié)合。
洗滌:用洗滌緩沖液沖洗微孔板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。
加酶結(jié)合物:加入酶標(biāo)記的二抗,再次溫育,使酶結(jié)合物與已結(jié)合的 ROS - 一抗復(fù)合物結(jié)合。
洗滌:重復(fù)洗滌步驟,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物。
加底物顯色:加入底物溶液,酶催化底物反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化。
終止反應(yīng):加入終止液,終止酶促反應(yīng)。
讀數(shù):使用酶標(biāo)儀在特定波長下測定微孔板的吸光度值。
細(xì)胞氧化應(yīng)激研究:檢測細(xì)胞在不同刺激條件下 ROS 的產(chǎn)生變化,探究細(xì)胞氧化應(yīng)激的機(jī)制。
疾病診斷與研究:在多種疾病如心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、腫瘤等中,ROS 水平往往發(fā)生改變,可作為疾病診斷和病情評估的潛在標(biāo)志物。
藥物研發(fā):評估藥物對細(xì)胞或生物體 ROS 水平的影響,篩選具有抗氧化活性的藥物。
靈敏度高:能夠檢測到低濃度的 ROS,滿足微量樣本的檢測需求。
特異性強(qiáng):抗原抗體的特異性結(jié)合,有效減少交叉反應(yīng),保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
操作簡便:試劑盒提供了完整的試劑和操作說明,無需復(fù)雜的儀器設(shè)備,便于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測。
重復(fù)性好:嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制,確保不同批次試劑盒檢測結(jié)果的一致性和可靠性。