高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的大鼠 EGF,最小可檢測值可達(dá)皮克(pg)級別,滿足對微量樣本中 EGF 含量檢測的需求,為研究 EGF 在低表達(dá)水平下的生理功能和病理機(jī)制提供了有力支持。
良好特異性:試劑盒中的抗體經(jīng)過精心篩選和優(yōu)化,對大鼠 EGF 具有高度特異性,與其他相關(guān)蛋白及干擾物質(zhì)幾乎無交叉反應(yīng),可有效避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn),確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
重復(fù)性好:嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制體系保證了試劑盒批內(nèi)和批間的重復(fù)性良好。多次重復(fù)檢測同一批樣本,所得結(jié)果的變異系數(shù)(CV)控制在極小范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)人員能夠獲得穩(wěn)定、可重現(xiàn)的數(shù)據(jù),為科學(xué)研究的可重復(fù)性提供保障。
操作簡便:試劑盒配備了齊全的試劑和詳細(xì)的操作說明書,實(shí)驗(yàn)步驟清晰明了,即使是新手實(shí)驗(yàn)人員也能快速上手。整個(gè)檢測過程無需復(fù)雜的儀器設(shè)備和專業(yè)技能,大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和人力成本。
檢測范圍廣:該試劑盒的檢測范圍覆蓋了大鼠 EGF 在生理和病理狀態(tài)下常見的濃度區(qū)間,既能檢測正常生理?xiàng)l件下低水平的 EGF 表達(dá),也能準(zhǔn)確測定在疾病或?qū)嶒?yàn)干預(yù)后可能出現(xiàn)的高水平 EGF 變化,適用于多種研究場景。
樣本準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求收集大鼠的各種樣本,如血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。確保樣本采集過程規(guī)范,避免污染和溶血等情況影響檢測結(jié)果。樣本采集后如需保存,應(yīng)置于 - 20℃或 - 80℃冰箱中,避免反復(fù)凍融。
試劑準(zhǔn)備:將試劑盒從冰箱取出,平衡至室溫。按照說明書要求依次準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗體、底物、洗滌液等試劑。標(biāo)準(zhǔn)品需進(jìn)行倍比稀釋,以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
加樣:將已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和處理后的樣本加入到預(yù)包被有抗大鼠 EGF 抗體的微孔板中,同時(shí)設(shè)置空白對照孔。輕輕振蕩混勻后,將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱中孵育一定時(shí)間,使樣本中的 EGF 與包被抗體充分結(jié)合。
洗滌:孵育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,以去除未結(jié)合的物質(zhì),減少非特異性背景信號。每次洗滌后需將微孔板拍干,確保洗滌效果。
加酶標(biāo)抗體:向每孔中加入適量的酶標(biāo)抗體,再次輕輕振蕩混勻,放入 37℃恒溫孵育箱中孵育一段時(shí)間,使酶標(biāo)抗體與已結(jié)合在包被抗體上的 EGF 結(jié)合。
再次洗滌:重復(fù)洗滌步驟,以去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。
顯色:向每孔中加入底物工作液,輕輕振蕩混勻后,將微孔板置于 37℃避光孵育,此時(shí)酶標(biāo)抗體上的酶會催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顏色會逐漸加深。
終止反應(yīng):當(dāng)顯色達(dá)到預(yù)期效果后,加入終止液終止反應(yīng)。此時(shí)溶液顏色將不再變化,應(yīng)立即使用酶標(biāo)儀在特定波長下測定各孔的吸光度值。