貼壁生長的細胞：

　　1、貼壁生長的細胞用T25細胞培養(yǎng)瓶發(fā)貨，收到細胞后，拆開自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒。

 

　　2、消毒后用顯微鏡觀察細胞狀態(tài)，并拍下細胞照片。

 

　　3、將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境。

 

　　4、平衡后將T25瓶中培養(yǎng)基吸出用離心管裝好備用。

 

　　5、如細胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6mL培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。

 

　　懸浮生長的細胞：

　　1、懸浮細胞發(fā)貨復蘇后用離心管發(fā)貨，拆開包裝離心管的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒。

 

　　2、然后用顯微鏡觀察細胞狀態(tài)。

 

　　3、將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上。

 

　　4、平衡完成后，離心收集細胞，棄上清。

 

　　5、用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

 

　　人血管平滑肌細胞的培養(yǎng)步驟：

　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

 

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。