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主營產(chǎn)品： 進(jìn)口透析袋,密理博ECL發(fā)光液,B27無血清培養(yǎng)基,Gibco膠原酶 |
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2017-2-9 閱讀(18402)
要談0.1M PBS，我們可以先談一談0.01M PBS。因為0.01M PBS是比較清楚，沒什么爭論的。一般用于免疫組化的0.01M PBS配方為：NaH2PO4•2H2O 0.2964g，Na2HPO4•12H2O 2.9g，NaCl 8g。如果用于細(xì)胞培養(yǎng)，可以用這個配方：NaCl 8.00，Na2HPO.12H2O 2.90，KCl 0.2，KH2PO4 0.24。大家可以看出，同樣是0.01M PBS，但他們兩的配方并不*一樣，不過，這個是可以理解的，做細(xì)胞培養(yǎng)，當(dāng)然是要很好的保證細(xì)胞的活性，盡可能的保證所處的環(huán)境。而后一個配方加入了K，就是為了維護(hù)Na/K平衡。而前一個配方，只是做免疫組化，細(xì)胞已經(jīng)固定過的，也就不談什么活性不活性了，只要細(xì)胞不變形就OK了。因而維護(hù)Na/K平衡就沒有必要了。因而一切從簡。當(dāng)然了，用后一個配方做免疫組化行不行呢？當(dāng)然是一點(diǎn)問題都沒有。而如果用前一個配方高壓后用于細(xì)胞清洗，行與不行，本人沒有測試過，但為了保險起見，還是算了。
我們看一看這兩個配方，NaCl占主要成分，維持滲透壓，而HPO4/ H2PO4當(dāng)然是維持PH值了。這個0.01M是什么意思？NaCl濃度為8/58.5=0.13675M，HPO4濃度為2.9/358.14= 0.0081M，H2PO4濃度為0.2964/156.01= 0.0019M。大家一看這個結(jié)果就知道，0.01M是指磷酸根濃度。
如此類推，那個0.1M的PBS的配方就應(yīng)該是NaH2PO4•2H2O 2.964g，Na2HPO4•12H2O 29g，NaCl 8g。用于細(xì)胞培養(yǎng)目前倒沒聽人說要用0.1M的PBS，所以在此就不做討論。
這樣一推算，感覺0.1M PBS也很簡單，但是，我百度或者谷歌0.1M PBS的配方，都沒有找到我所推論出的配方，找到的幾頁也都是關(guān)于0.1M PBS的應(yīng)用。這個怪了，也許是國家保密配方吧（開個玩笑）。這個0.1M PBS配方的錯誤之處在于滲透壓。
我們簡單的計算一下滲透壓。πV=nRT 或π=cRT （式中π為稀溶液的滲透壓，V為溶液的體積，c為溶液的濃度，R為氣體常數(shù)，n為溶質(zhì)的物質(zhì)的量，T為溫度）。這個東東算起來比較麻煩，簡單點(diǎn)說就是，滲透壓與總離子濃度（摩爾濃度）成正比。
看看生理鹽水，總濃度為2*9/58.5=0.307692308M
再看看0.01M PBS總離子濃度為0.13675*2+0.0081*3+0.0019*2=0.3016M
再看看0.1M PBS 總離子濃度為0.13675*2+0.081*3+0.019*2=0.2735+0.243+0.038 =0.5545M，這個與生理鹽水差老遠(yuǎn)了。因而用這個去做免疫組化或者去配多聚甲醛，就有點(diǎn)問題了。
濃度高了，當(dāng)然是減少一些NaCl了。0.307692308(標(biāo)準(zhǔn)生理鹽水)-(0.243+0.038)/ 2=0.026。0.026/2*58.5=0.78g。
修正后的0.1M PBS配方為NaH2PO4•2H2O 2.964g，Na2HPO4•12H2O 29g，NaCl 0.78g。
假如不加zui后一點(diǎn)NaCl，總離子濃度為：0.081*3+0.019*2=0.281M。這個濃度與理鹽水0.307692308M相關(guān)8.7%,而與0.01M PBS相差6.8%。因而我個人認(rèn)為，對于體外的死細(xì)胞而言，這個差別不是特別大。所以傳言的0.1M PBS的關(guān)相應(yīng)用應(yīng)該是筆誤。應(yīng)該是0.1M PB。
相關(guān)產(chǎn)品
PBS干粉，用于免疫組化等常規(guī)實驗
PBS液體，用于細(xì)胞培養(yǎng)用。
