臺盼藍(lán)與 AOPI 染色怎么選？博大博聚計數(shù)儀給答案

在細(xì)胞實驗中，活率計數(shù)是評估細(xì)胞狀態(tài)的核心指標(biāo)，臺盼藍(lán)染色與 AOPI 熒光染色作為主流方法，常讓研究者在選擇時陷入權(quán)衡。事實上，二者并無絕對優(yōu)劣，僅存在場景適配差異 ——博大博聚-全自動細(xì)胞計數(shù)儀，正是能精準(zhǔn)支撐兩種需求的全能工具。

臺盼藍(lán)染色作為沿用數(shù)十年的經(jīng)典方法，憑借操作便捷、成本可控的優(yōu)勢，至今仍是基礎(chǔ)實驗室的常用染色方法。其原理是利用活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜對染料的排斥作用：活細(xì)胞不被染色，死細(xì)胞因細(xì)胞膜破損被染成藍(lán)色，整個染色-計數(shù)流程可在幾分鐘內(nèi)完成。對于常規(guī)細(xì)胞傳代、教學(xué)實驗等對效率要求高的場景，這種“即染即測"的特性尤為實用。

但臺盼藍(lán)染色的局限性也需正視：

① 時效性嚴(yán)格：染色后需在10分鐘內(nèi)完成檢測。這是因為活細(xì)胞對臺盼藍(lán)的排斥是暫時的——長時間暴露于染料中，臺盼藍(lán)的細(xì)胞毒性會逐漸破壞活細(xì)胞膜完整性，導(dǎo)致原本存活的細(xì)胞被染色，最終使活率檢測值偏低。在高通量實驗中，若批量樣本處理間隔過長，極易出現(xiàn)前后數(shù)據(jù)偏差。

②-復(fù)雜樣本適應(yīng)性弱：對于直徑較小的細(xì)胞（如外周血單個核細(xì)胞，PBMC）或含大量雜質(zhì)的樣本，臺盼藍(lán)的明場檢測模式易受干擾。由于雜質(zhì)與細(xì)胞在形態(tài)、顏色上區(qū)分度低，顯微鏡下難以精準(zhǔn)識別，可能導(dǎo)致漏計（誤將小細(xì)胞當(dāng)作雜質(zhì)）或錯計（誤將雜質(zhì)當(dāng)作細(xì)胞）。

此時，AOPI 熒光染色的優(yōu)勢便凸顯出來。AOPI熒光染色通過兩種核酸染料的協(xié)同作用實現(xiàn)精準(zhǔn)區(qū)分：吖啶橙（AO）可穿透所有細(xì)胞膜，與活細(xì)胞、死細(xì)胞的核酸結(jié)合，在488nm 激發(fā)光下發(fā)出綠色熒光；碘化丙啶（PI）同樣能與核酸結(jié)合，但僅能通過破損的細(xì)胞膜進(jìn)入死細(xì)胞，在535nm激發(fā)光下發(fā)出紅色熒光——最終呈現(xiàn) “活細(xì)胞綠、死細(xì)胞紅" 的清晰信號。

博大博聚-全自動細(xì)胞計數(shù)儀搭載明場+雙色熒光通道：明場通道適配臺盼藍(lán)染色，雙色熒光通道：488nm 激發(fā) / 525nm 發(fā)射通道捕捉 AO 綠色信號，535nm 激發(fā) / 610nm 發(fā)射通道識別 PI 紅色信號，即使是早期凋亡（細(xì)胞膜輕微破損）的細(xì)胞也能被精準(zhǔn)判定。更重要的是，熒光信號的特異性讓 AOPI 對復(fù)雜樣本的耐受性遠(yuǎn)超臺盼藍(lán)：處理含大量細(xì)胞碎片、血清顆粒的樣本時，雜質(zhì)不會產(chǎn)生熒光信號，不干擾計數(shù)；

當(dāng)然，AOPI 熒光染色也有需注意的短板：

① 成本較高：AOPI熒光染料成本顯著高于臺盼藍(lán)染料；
② 操作要求更嚴(yán)：熒光染料易受強(qiáng)光淬滅，需避光操作（染色后、檢測前需避免直射光），否則可能因信號衰減導(dǎo)致計數(shù)偏差。

因此，在基礎(chǔ)實驗、學(xué)生訓(xùn)練等對成本敏感且樣本簡單的場景，臺盼藍(lán)仍是性價比之選；而在生物制藥（如 CAR-T 細(xì)胞制備）、復(fù)雜樣本分析（如 PBMC 活性檢測）等對精度要求嚴(yán)苛的場景，AOPI 顯然更具優(yōu)勢。

博大博聚-全自動細(xì)胞計數(shù)儀通過模塊化設(shè)計實現(xiàn) “一鍵切換"：臺盼藍(lán)染色模式支持高通量快速計數(shù)，AOPI熒光染色模式搭載 AI 智能算法（可自動識別細(xì)胞與雜質(zhì)、拆分聚團(tuán)細(xì)胞），兼顧效率與精度。無論你是高校實驗室的教學(xué)研究者，還是生物制藥企業(yè)的GMP級質(zhì)控人員，都能找到適配方案。

選擇哪種染色？答案藏在你的實驗需求里。而博大博聚-全自動細(xì)胞計數(shù)儀，始終是那個懂你所需的可靠伙伴，讓每一次活率計數(shù)都精準(zhǔn)高效。