小鼠肝星狀細(xì)胞 返回列表頁

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

名稱    小鼠肝星狀細(xì)胞
2.組織來源：肝臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠肝星形細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞（HSC）又名肝貯脂細(xì)胞、A貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等，是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞，各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細(xì)胞。正常情況下，HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?，激活?/span>HSC可通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建，此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi)，是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源，在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟*的間充質(zhì)細(xì)胞，約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群，肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu)，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外，肝星形細(xì)胞能通過合成肝細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肝星形細(xì)胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肝星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：
收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

尖鐮孢   臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus

金黃色葡萄球菌凍干粉   蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani

噬糖鹽紅菌   雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)

梭菌   產(chǎn)紫青霉

魯氏酵母   深黃被孢霉
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)elisa分析檢測試劑盒

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)elisa分析檢測試劑盒

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)elisa分析檢測試劑盒

大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)elisa分析檢測試劑盒

大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa分析檢測試劑盒
小鼠肝星狀細(xì)胞人8-異前列腺素F2α（8-isoPGF2α）elisa檢測試劑盒

人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa分析檢測試劑盒

人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa檢測試劑盒

人Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)elisa分析檢測試劑盒

人Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)elisa檢測試劑盒
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