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皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 09:26:02瀏覽次數(shù):542次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2895 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Flap Structure Specific Endonuclease 1
物種 Homo sapiens (Human,人)
皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:離子型受體4抗體 英文名稱:GluA4 0.2ml磷酸化離子型受體4抗體 英文名稱:phospho-GluA4 (Ser862) 0.1ml細胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基2抗體 英文名稱:CKS2 0.2ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Asparaginyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (NARS2)產(chǎn)品名稱:天冬酰tRNA合成酶2(NARS2)重組蛋白物種:Human,人AsnRS; Asparaginyl-tRNA synthetase

Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)產(chǎn)品名稱:尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白物種:Mouse,小鼠AKU; HGO; Homogentisic Acid Oxidase; Homogentisicase; Homogentisate oxygenase

Active Deoxyribonuclease I (DNASE1)產(chǎn)品名稱:脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白物種:Human,人DNaseI; DNL1; DRNI; DNase-I; Dornase alfa

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2895

 

 

英文名稱:Recombinant Flap Structure Specific Endonuclease 1 (FEN1)

MF1; RAD2; Maturation Factor-1; DNase IV

型號:GOY-01D2895

酶與激酶

遺傳科學

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞核, 線粒體

預(yù)測分子量:25.2kDa

實際分子量:26kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Met1~Thr195 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:6.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

MV3(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Mezlocillin

 ME-180(人子宮頸表細胞)5×106cells/瓶×2gersion

二去甲基米非司 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Didemethyl Mifepristone

 HKC(人胚腎上細胞)5×106cells/瓶×2

N-去甲基米非司 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 N-Demethyl Mifepristone

 MFC(小鼠胃細胞)5×106cells/瓶×2

22-羥基米非司 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 22-Hydroxy Mifepristone

 ACHN(人腎細胞)5×106cells/瓶×2

米平-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Mirtazapine-d3

 CT26.WT(小鼠結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2

米平N-氧化物 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Mirtazapine N-Oxide

 小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:PA317

10-氧米平(米平雜質(zhì)F) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 10-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity F)

 A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2

1-氧米平(米平雜質(zhì)C) 質(zhì)量規(guī)格:美國進口 1-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity C)

皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人人葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 創(chuàng)傷弧菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M,pH7.5   Potassium Acetate Solution,1M,pH7.5   常溫保存

1瓶 RTE細胞株 RTE 低溫運輸和保存

人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂 DG18 Agar 250g

馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

碘伏(液體) Povidone-iodine (liquid) 500g

225mlGN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個/包

ICE蛋白激活因子(IRAP)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

 


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