雞小腸黏膜上皮原代細胞

雞小腸黏膜上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

雞小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責(zé)腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。

方法簡介：

公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液   FD4細胞，人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞 小鼠畸胎瘤細胞,F9細胞 CM-H095人骨骼肌細胞CM-R014大鼠氣管和支氣管上皮細胞100mL 小鼠原代胰腺星狀細胞 人原代踝或膝滑成纖維細胞

OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(大、小鼠同源：人源見bs-0606P)

CEBPG Protein Human 重組人 CEBPG / CEBP gamma 蛋白

IL8重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein

S100A4 Protein Mouse 重組小鼠 S100A4 蛋白

CA2重組人 Carbonic Anhydrase II / CA2 蛋白 Protein

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒

Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒

humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒 進口分裝

HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)試劑盒

組織GSK3α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISAKit   ELISA.  

大鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISAKit   ELISA.  

大鼠乙酰受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA.

雞小腸黏膜上皮原代細胞豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒

Humanai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclin-dependekinase1,CDK-1試劑盒人周期素依賴性激酶1(CDK-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPrednisolone,PSELISAKit人龍(PS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)

HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。