在發(fā)酵工程領(lǐng)域,蛋白胨雖為微生物生長(zhǎng)提供優(yōu)質(zhì)氮源及多種營(yíng)養(yǎng)成分,但發(fā)酵過(guò)程的順利進(jìn)行和目標(biāo)產(chǎn)物的高效合成,離不開(kāi)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同作用。除蛋白胨外,還有以下幾類重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
一、碳源
碳源是微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物中碳架的來(lái)源,同時(shí)為微生物生長(zhǎng)和代謝提供能量。在發(fā)酵工程中,碳源的種類和濃度對(duì)微生物的生長(zhǎng)速率、代謝途徑以及發(fā)酵產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量都有顯著影響。
(一)糖類碳源
糖類是碳源,可分為單糖、雙糖和多糖。葡萄糖作為單糖,是微生物最易利用的碳源,能夠快速被微生物吸收利用,在發(fā)酵初期可促進(jìn)微生物快速生長(zhǎng)繁殖,如在釀酒酵母發(fā)酵生產(chǎn)酒精過(guò)程中,葡萄糖可迅速被酵母細(xì)胞攝取并通過(guò)糖酵解途徑轉(zhuǎn)化為丙酮酸,進(jìn)而生成酒精 。蔗糖、麥芽糖等雙糖需在微生物分泌的水解酶作用下分解為單糖后才能被利用。多糖類如淀粉、纖維素等,來(lái)源廣泛且成本較低,在工業(yè)發(fā)酵中應(yīng)用普遍。例如,在淀粉酶發(fā)酵生產(chǎn)中,以淀粉為碳源,微生物可分泌淀粉酶將其水解為葡萄糖,既滿足自身生長(zhǎng)需求,又可誘導(dǎo)淀粉酶的合成 。
(二)非糖類碳源
除糖類外,甘油、有機(jī)酸(如醋酸、乳酸)、醇類(如甲醇)等也可作為碳源。甘油常用于一些對(duì)碳源利用有特殊要求的微生物發(fā)酵,如某些產(chǎn)甘油酯的微生物發(fā)酵。有機(jī)酸可直接參與微生物的代謝過(guò)程,在特定發(fā)酵中具有優(yōu)勢(shì)。甲醇則是甲基營(yíng)養(yǎng)型微生物的重要碳源,這類微生物能夠利用甲醇進(jìn)行生長(zhǎng)和代謝,在一些特殊代謝產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)中有重要應(yīng)用 。
二、氮源(非蛋白胨類)
氮源是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等含氮物質(zhì)的重要原料,除蛋白胨外,還有無(wú)機(jī)氮源和其他有機(jī)氮源。
(一)無(wú)機(jī)氮源
無(wú)機(jī)氮源包括銨鹽(如硫酸銨、氯化銨)、硝酸鹽(如硝酸鈉、硝酸鉀)等。銨鹽中的銨離子可直接被微生物吸收利用,參與氨基酸等含氮物質(zhì)的合成,在發(fā)酵培養(yǎng)基中常作為速效氮源 。硝酸鹽需要在微生物的硝酸還原酶作用下,先還原為亞硝酸鹽,再進(jìn)一步還原為銨離子才能被利用,其作用相對(duì)緩慢,可作為遲效氮源 。在谷氨酸發(fā)酵中,適量添加硫酸銨可促進(jìn)菌體生長(zhǎng)和谷氨酸合成;而在一些抗生素發(fā)酵中,無(wú)機(jī)氮源與有機(jī)氮源配合使用,能夠更好地滿足微生物不同生長(zhǎng)階段的需求 。
(二)其他有機(jī)氮源
酵母粉富含多種氨基酸、維生素和微量元素,是發(fā)酵工程中常用的有機(jī)氮源,可為微生物提供豐富的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)其生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物合成。玉米漿是玉米淀粉生產(chǎn)過(guò)程中的副產(chǎn)物,含有豐富的可溶性蛋白、多肽、氨基酸、糖類等成分,具有營(yíng)養(yǎng)豐富、價(jià)格低廉等特點(diǎn),在抗生素、氨基酸等發(fā)酵生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用 。此外,豆餅粉、魚粉等也是常見(jiàn)的有機(jī)氮源,它們含有不同的氨基酸組成和營(yíng)養(yǎng)成分,可根據(jù)發(fā)酵需求進(jìn)行選擇和搭配 。
三、無(wú)機(jī)鹽
無(wú)機(jī)鹽在發(fā)酵過(guò)程中具有多種重要功能,如參與微生物細(xì)胞的組成、調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓、維持酶的活性等。
(一)大量元素
大量元素包括磷、硫、鎂、鉀、鈣等。磷酸鹽是微生物生長(zhǎng)過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它參與核酸、磷脂等生物大分子的合成,同時(shí)在能量代謝中發(fā)揮重要作用,如在 ATP 的合成和分解過(guò)程中起關(guān)鍵作用 。硫酸鹽是合成含硫氨基酸(如半胱氨酸、蛋氨酸)和輔酶的原料。鎂離子可激活多種酶的活性,如己糖激酶、異檸檬酸脫氫酶等,對(duì)微生物的糖代謝、三羧酸循環(huán)等代謝途徑有重要影響 。鉀離子可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)滲透壓,維持細(xì)胞的正常生理功能,同時(shí)對(duì)某些酶的活性也有調(diào)節(jié)作用 。鈣離子在細(xì)菌芽孢形成、細(xì)胞膜穩(wěn)定性等方面具有重要作用 。
(二)微量元素
微量元素包括鐵、鋅、錳、銅、鈷等,雖然微生物對(duì)它們的需求量極少,但卻是微生物生長(zhǎng)和代謝。鐵是細(xì)胞色素、過(guò)氧化氫酶等酶的組成成分,參與電子傳遞和氧化還原反應(yīng) 。鋅是許多酶的活性中心組成部分,如乙醇脫氫酶、乳酸脫氫酶等,對(duì)微生物的代謝過(guò)程有重要影響 。錳離子可激活某些水解酶和轉(zhuǎn)移酶的活性,在微生物的糖代謝和氨基酸代謝中發(fā)揮作用 。這些微量元素在發(fā)酵過(guò)程中通常以痕量存在,但其缺乏或過(guò)量都會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物合成 。
四、生長(zhǎng)因子
生長(zhǎng)因子是一類對(duì)微生物正常代謝且不能用簡(jiǎn)單的碳源或氮源自行合成的有機(jī)物,主要包括維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶及其衍生物等。
(一)維生素
維生素在微生物代謝中作為輔酶或輔基的組成成分,參與各種代謝反應(yīng)。例如,維生素 B 族中的硫胺素(維生素 B1)是丙酮酸脫氫酶系的輔酶成分,參與糖的有氧氧化過(guò)程;核黃素(維生素 B2)是黃素蛋白的輔基,在電子傳遞鏈中起重要作用 。不同微生物對(duì)維生素的需求存在差異,有些微生物能夠自身合成部分維生素,而有些則需要在培養(yǎng)基中添加外源維生素才能正常生長(zhǎng) 。
(二)氨基酸
除作為氮源參與蛋白質(zhì)合成外,某些氨基酸對(duì)特定微生物是必需的生長(zhǎng)因子。例如,對(duì)于一些乳酸菌,由于自身不能合成某些氨基酸(如組氨酸、異亮氨酸等),必須在培養(yǎng)基中添加這些氨基酸才能正常生長(zhǎng) 。
(三)嘌呤和嘧啶及其衍生物
嘌呤和嘧啶及其衍生物是合成核酸的重要原料,微生物缺乏這些物質(zhì)時(shí),核酸合成受阻,生長(zhǎng)受到抑制 。在發(fā)酵生產(chǎn)核苷酸類物質(zhì)時(shí),添加適量的嘌呤和嘧啶及其衍生物,可促進(jìn)相關(guān)代謝途徑,提高核苷酸的產(chǎn)量 。
發(fā)酵工程中,除蛋白胨外,碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)各自承擔(dān)著功能。它們之間相互配合、協(xié)同作用,共同為微生物的生長(zhǎng)、代謝和發(fā)酵產(chǎn)物合成創(chuàng)造適宜的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。在實(shí)際發(fā)酵生產(chǎn)中,根據(jù)不同的微生物種類和發(fā)酵目標(biāo),合理選擇和優(yōu)化這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類、濃度和配比,是實(shí)現(xiàn)高效發(fā)酵、提高發(fā)酵產(chǎn)物產(chǎn)量和質(zhì)量的關(guān)鍵。