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miRNA定量——艾美捷miRNA定量檢測試劑盒方案

時間：2021/4/12閱讀：211
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miRNA定量檢測是艾美捷的重點關注領域，通過提供如miRNA定量檢測試劑盒等精彩方案，來幫助客戶解決miRNA檢測難題。

 

一、前提概要

 

作為一種內源性非編碼小分子RNA, miRNA在許多生命活動中起著重要作用, 如當機體內的某些miRNA表達下調時, 就會更容易罹患癌癥和其他一系列疾病。這一現(xiàn)象提示, 人們可通過對miRNA進行定量檢測來實現(xiàn)對相關疾病的早期診斷。

 

二、miRNA定量PCR技術服務

 

1.加尾法原理：

miRNA.jpg

特色：

①RNA加尾和引物延伸法，樣本用量少（1μg）且不需分離miRNA。

②采用通用反轉錄引物，一次反轉錄產(chǎn)物可用于上百個miRNA檢測。

③檢測通量高，可同時檢測數(shù)十個miRNAs。

④不同末端成熟miRNA都能被加尾和反轉錄，保證定量準確性。

⑤配合QIAGEN試劑盒，保證實驗可靠性，示意圖如下；

⑥擴增產(chǎn)物特異性高，通過產(chǎn)物熱解離曲線（融解曲線）判斷。

 

2.莖環(huán)法原理：

miRNA-1.jpg

 

三、microRNA純化試劑盒

 

microRNA Purification Kit【microRNA純化試劑盒 Cat#21300】基于Norgen純化柱與無苯酚配方，適用于動物細胞，組織，細菌，血液，植物組織。

特色：

①25分鐘提取高質量和純度的miRNA（< 200 nt）

②兩柱體系：在純化柱上消除大RNA，在第二根純化柱上捕獲microRNA

③洗脫的microRNA可用于RT-qPCR, Microarrays, Northern Blotting以及NGS等應用.

 

miRNA-2.png

從Hela細胞中提取microRNA

 

miRNA-3.png

qPCR檢測不同品牌的提取效果

 

來源：艾美捷科技

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