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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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使用參考丨Biogradetech DAB顯色試劑盒

時(shí)間:2023/8/8閱讀:148
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二氨基聯(lián)苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過(guò)氧化物酶(POD)的顯色底物,DAB顯色液主要用于免疫過(guò)氧化物酶法,適用于辣根過(guò)氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過(guò)氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng),于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物,免疫印記可直接在膜上顯示條帶;免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫5-20分鐘,隨后在顯微鏡下觀察顯色情況,顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固,其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察,也可經(jīng)OsO4處理后,增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度,用于電鏡觀察。


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艾美捷 Biogradetech DAB顯色試劑盒

中文名稱:DAB顯色試劑盒

英文名字:DAB Substrate Kit (DAB staining)

Biogradetech貨號(hào):B-IMWRS51-100T

規(guī)格:100T

保存建議:DAB顯色試劑盒儲(chǔ)存條件:2-8°C避光

 

本試劑盒可以用于細(xì)胞或組織在免疫組化或原位雜交時(shí)結(jié)合的辣根過(guò)氧化物酶顯色,也可以用于 Western 等結(jié)合有辣根過(guò)氧化物酶的膜的顯色檢測(cè)。同時(shí)也可以用于細(xì)胞或組織內(nèi)源性的辣根過(guò)氧化物酶顯色。

 

DAB顯色試劑盒使用參考:

1. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品或膜,在與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤?,用適當(dāng)洗滌 液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也用適 當(dāng)洗滌液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。

2. 按照1:1的比例將顯色液A、B液混勻,混勻后即配制成DAB染色工作液。

3. 后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入適量DAB染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。

4. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)),直至顯色至預(yù)期深淺。

5. 去除DAB染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2次即可終止顯色反應(yīng)。

6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色,以便于觀察。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。

 

注意事項(xiàng):

DAB 對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 


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