Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒測定原理&樣本準(zhǔn)備指南

集落刺激因子1受體（CSF1R），也稱為M-CSFR和CD115，是一種細(xì)胞表面蛋白，在人類中由CSF1R基因編碼。該基因位于5號染色體的長臂（5q32）上，位于Crick（負(fù)）鏈。編碼的蛋白是一種酪氨酸激酶跨膜受體，屬于酪氨酸蛋白激酶的CSF1/PDGF受體家族。編碼的蛋白是一種單次跨膜I型膜蛋白，作為集落刺激因子1的受體，這是一種控制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生、分化和功能的細(xì)胞因子。CSF1R及其配體集落刺激因子1在乳腺腺體的發(fā)育中起著重要作用，可能參與乳腺腺體癌變的過程。

Csf1r（小鼠）ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫測定法，用于定量測量小鼠Csf1r。

艾美捷Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒：

貨號：KA3348

校準(zhǔn)范圍：62.5至4000皮克/毫升

適用樣本：細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、血漿（EDTA、肝素）、血清。

樣本體積：100微升

標(biāo)記：HRP偶聯(lián)

檢測方法：比色法

法規(guī)狀態(tài)：僅限研究使用（RUO）

反應(yīng)性：小鼠

應(yīng)用：定量

儲存說明：在4℃下可儲存6個(gè)月，在-20℃下可儲存12個(gè)月。避免多次凍融循環(huán)。

Entrez GeneID：12978

基因符號：Csf1r

基因別名：AI323359、CD115、CSF-1R、Csfmr、Fim-2、Fms、M-CSFR

僅限研究使用（RUO）

Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒測定原理：

Csf1r（小鼠）ELISA試劑盒是一種固相免疫測定法，專門設(shè)計(jì)用于測量小鼠Csf1r。該試劑盒使用預(yù)包被有針對Csf1r特異性抗體的96孔條板。檢測抗體是針對Csf1r的生物素化抗體。捕獲抗體是大鼠來源的單克隆抗體，檢測抗體是山羊來源的多克隆抗體。試劑盒包含重組小鼠Csf1r，免疫原：表達(dá)系統(tǒng)為標(biāo)準(zhǔn)：NS0；免疫原序列：A20-S511。試劑盒已通過即用型試劑進(jìn)行了分析驗(yàn)證。要測量小鼠Csf1r，將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入孔中，然后加入生物素化的檢測抗體。用PBS或TBS緩沖液洗滌孔，然后加入鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC-HRP）。用PBS或TBS緩沖液洗去未結(jié)合的ABC-HRP，然后加入TMB。TMB是HRP的底物，會被催化產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色產(chǎn)物在450納米處的吸光度與樣本中的小鼠Csf1r成線性比例。使用酶標(biāo)儀讀取每個(gè)孔中黃色產(chǎn)物的吸光度，并將樣本孔的讀數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比，以確定樣本中小鼠Csf1r的濃度。

樣本準(zhǔn)備：

? 樣本準(zhǔn)備和儲存

這些樣本收集說明和儲存條件僅供參考，樣本穩(wěn)定性尚未評估。

樣本稀釋比例應(yīng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定（對樣本進(jìn)行系列稀釋，查看哪種稀釋比例的結(jié)果理想，接近標(biāo)準(zhǔn)范圍的中間值）。一般來說，高濃度樣本可以稀釋1:100，中等濃度樣本1:10，低濃度樣本1:2或直接使用。

• 細(xì)胞培養(yǎng)上清液：通過離心清除顆粒，立即測定或在-20℃儲存樣本。

• 血清：使用血清分離管（SST），讓血清在室溫下凝固約四小時(shí)。然后，以大約1000 x g的離心力離心15分鐘。立即測定或在-20℃儲存樣本。

• 血漿：使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。以大約1000 x g的離心力離心15分鐘。立即測定或在-20℃儲存樣本。

*注意：重要的是不要使用上述以外的抗凝劑處理血漿，因?yàn)槠渌鼓齽┛赡軙钄嗫贵w結(jié)合位點(diǎn)。

• 細(xì)胞裂解液：裂解細(xì)胞，確保沒有可見的細(xì)胞沉淀。以大約10000 x g的離心力離心細(xì)胞裂解液5分鐘。收集上清液。

• 樣本收集注意事項(xiàng)

建議樣本制備后立即使用。

避免所有樣本的反復(fù)凍融循環(huán)。

如果打算使用上述未列出的樣本類型與試劑盒一起使用，建議客戶進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，以確保結(jié)果的可靠性。

由于化學(xué)干擾，使用化學(xué)裂解緩沖液制備的組織或細(xì)胞提取樣本可能會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。

由于細(xì)胞活性、細(xì)胞數(shù)量或采樣時(shí)間等因素，細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本可能無法被試劑盒檢測到。

在進(jìn)行測定之前，樣本應(yīng)恢復(fù)至室溫（18-25℃），無需額外加熱。

在使用測定之前，應(yīng)預(yù)測樣本濃度。如果樣本濃度不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，用戶必須確定其特定實(shí)驗(yàn)的最佳樣本稀釋比例。

? 樣本稀釋指南

用戶需要估計(jì)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度，并使用適當(dāng)?shù)南♂屢蜃?，使稀釋后的目?biāo)蛋白濃度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的O.D.值范圍內(nèi)。使用提供的稀釋緩沖液稀釋樣本。每種樣本類型都需要進(jìn)行稀釋系列的預(yù)實(shí)驗(yàn)。必須將樣本與樣本稀釋液充分混合。

標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于演示，不應(yīng)用于計(jì)算未知量。每次進(jìn)行測定時(shí)，應(yīng)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線。