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基于已知對泛素具有親和力的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,串聯(lián)泛素結(jié)合實體(TUBEs)已被開發(fā)用于分離和鑒定泛素化蛋白。 與單個泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA)相比,TUBEs對多泛素結(jié)構(gòu)的親和力可增加多達1000倍。此外,TUBEs對多泛素化蛋白具有保護作用,即使在相對較低的豐度下也能檢測到。這些特性有效地“捕獲"了處于多泛素化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。TUBEs可用于從細胞和組織提取物中分離、富集和鑒定泛素化蛋白。與TUBE 1偶聯(lián)的磁性珠子可以在一步中高效回收多泛素化蛋白,無需離心。這種磁性TUBEs能夠更c底地去除未結(jié)合的上清液,從而降低背景。多泛素化蛋白可以輕松地從TUBEs中分離出來,用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究或通過Western blotting進行鑒定。
UM501M是通過涂覆聚合物高容量磁性珠子設(shè)計的,以實現(xiàn)對多泛素化蛋白的z越富集,同時最小化在組織和細胞裂解液中與蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合。
艾美捷UM501M:高容量磁珠管1:
貨號:UM-0501M-1000
物理狀態(tài):液體
數(shù)量:1 mL磁性珠子
濃度:可變
儲存:+4℃,避免在此溫度以下儲存
UM501M:高容量磁珠管1應(yīng)用:
從細胞系、組織和器官中捕獲多泛素化蛋白
分離多泛素化蛋白用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究
保護多泛素化蛋白免受去泛素化和蛋白酶體降解
UM501M:高容量磁珠管1優(yōu)勢:
一步回收多泛素化蛋白
無需離心,背景更低
從TUBEs中高效分離多泛素化蛋白
親和力比單個UBA結(jié)構(gòu)域高出多達1000倍
避免為捕獲而過度表達親和標簽泛素
文獻參考:
Hjerpe, R, Aillet, F, Lopitz-Otsoa, F, Lang, V, England, P, and Rodriguez, MS., Efficient protection and isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities. EMBO Rep. 10,1250-1258 (2009).
Stormo, Adrienne ED, Farbod Shavarebi, Molly FitzGibbon, Elizabeth M. Earley, Hannah Ahrendt, Lotus S. Lum,Erik Verschueren et al (2022) "The E3 ligase TRIM1 ubiquitinates LRRK2 and controls its localization,degradation, and toxicity." Journal of Cell Biology 221, no. 4.
Sarbanes, Stephanie L., Vincent A. Blomen, Eric Lam, S?ren Heissel, Joseph M. Luna, Thijn R. Brummelkamp,Erik Falck-Pedersen, H-Heinrich Hoffmann, and Charles M. Rice. (2021) "E3 ubiquitin ligase Mindbomb 1 facilitates nuclear delivery of adenovirus genomes." Proceedings of the National Academy of Sciences 118, no. 1: e2015794118.
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