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基于已知對泛素具有親和力的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,串聯(lián)泛素結(jié)合實(shí)體(Tandem Ubiquitin Binding Entities,TUBEs)已被開發(fā)用于分離和鑒定泛素化蛋白。與單個(gè)泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA)相比,TUBEs對多泛素鏈的親和力可提高多達(dá)1000倍。此外,TUBEs能夠保護(hù)多泛素化蛋白免受去泛素化和蛋白酶體降解,從而使其即使在相對低豐度下也能被檢測到。這些特性使得TUBEs能夠有效地“捕獲"處于多泛素化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。TUBEs可用于從細(xì)胞和組織提取物中分離、富集和鑒定泛素化蛋白。與TUBE 2偶聯(lián)的磁珠能夠在單一步驟中高效回收多泛素化蛋白,無需離心。磁性TUBEs可以更w全地去除未結(jié)合的上清液,從而降低背景信號。多泛素化蛋白可以輕松地從TUBEs中分離出來,用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究或通過Western blot進(jìn)行鑒定。
艾美捷泛素串聯(lián)結(jié)合實(shí)體2,磁珠偶聯(lián):
貨號:UM-0402M-1000
標(biāo)簽:不適用
分子量:不適用
物理狀態(tài):液體
數(shù)量:1 mL
濃度:可變
儲存:+4℃,避免低于此溫度儲存
應(yīng)用:
從細(xì)胞系、組織和器官中捕獲多泛素化蛋白
用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究的多泛素化蛋白分離
優(yōu)勢:
單步回收多泛素化蛋白
無需離心,背景更低
從TUBEs中高效分離多泛素化蛋白
親和力比單個(gè)UBA結(jié)構(gòu)域高至1000倍
避免使用過表達(dá)的親和標(biāo)簽泛素進(jìn)行捕獲
文獻(xiàn)參考:
1. Stormo, Adrienne ED, Farbod Shavarebi, Molly FitzGibbon, Elizabeth M. Earley, Hannah Ahrendt,Lotus S. Lum, Erik Verschueren et al 2022) "The E3 ligase TRIM1 ubiquitinates LRRK2 and controls its localization, degradation, and toxicity." Journal of Cell Biology 221, no. 4.
2. Wolf, Lucie M., Annika M. Lambert, Julie Haenlin, and Michael Boutros. (2021) "EVI/WLS function is regulated by ubiquitylation and is linked to ER-associated degradation by ERLIN2." Journal of cell science 134, no. 16: jcs257790.
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