詳細(xì)介紹
兔原代前脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代前脂肪細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代前脂肪細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500ml | Rhesus antibody Rh PYGM 肌肉糖原0酸化酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
FDP ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物 96T | RALA: Ras樣蛋白A抗體 0.2ml |
Anti-GAD-65/FITC 熒光素標(biāo)記谷脫羧酶-65抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | MMP2: 基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體 0.1ml |
D型-過氧化酶活化增生受體抗體 Anti-PPAR-delta 0.2ml | Anti-CX36 /FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白36抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
MHC Class II: 組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13 規(guī)格 0.1ml |
NF-κB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亞基p65親和肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 其他白細(xì)胞介素 |
L129細(xì)胞,NCTC克隆929細(xì)胞 人Butt`s淋巴瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2 | IgG4 Others Human 人 IgG4-Fc (108 Ser/Pro) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
IgG/Gold 金標(biāo)記小鼠抗人IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml | NCI-H2227(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) |
OA1: 眼部白化病相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體 0.2ml | IL17F Others Human 人 IL-17F / Ierleukin-17F 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 | CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 |
IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml | 兔原代前脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
ST(豬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SW116細(xì)胞,人大腸癌細(xì)胞 人葡萄膜黑色素細(xì)胞,UM細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2 | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001B |