詳細(xì)介紹
兔原代脊髓成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代脊髓成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代脊髓成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用兔原代脊髓成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ZR-75-1細(xì)胞,癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系,CNE1-lmp\l細(xì)胞 CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh ABCE1 核糖核酸酶L抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
CCZ1: CCZ1蛋白抗體 0.2ml | Anti-HMGB1 高遷移率族蛋白B1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
HRH1: 組胺受體H1抗體 0.1ml | Anti-ARHI/FITC 熒光素標(biāo)記ARHI蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Spermine synthase: 精胺合成酶抗體 0.1ml | BRI3BP: 原基因1/bri3結(jié)合蛋白抗體 0.2ml |
Anti-CD167a/DDR1/FITC 熒光素標(biāo)記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | ACA ELISA Kit 大鼠抗粒/中心體抗體 96T |
NLRP10: 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 0.2ml | 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-貼壁生長HOPC |
BEL-7404人肝癌細(xì)胞 BEL-7404 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS | FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-PEG3/FITC 熒光素標(biāo)記PEG3蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | IL11RA Others Human 人 IL11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-ROCK2 Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM932 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 |
IQGAP1: 支架蛋白抗體 0.2ml | OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh sIgA/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml | 兔原代脊髓成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基Promocell C-23060 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium, 骨骼肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml |
BT549細(xì)胞,管癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) | TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | THP-1人單核白血病細(xì)胞 |
1.使用兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代脊髓成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。