詳細介紹
兔原代呼吸道上皮細胞專用培養(yǎng)基
兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持兔原代呼吸道上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含兔原代呼吸道上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代呼吸道上皮細胞的培養(yǎng)。
產品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 標簽) | Anti-Phospho-MYPT1 (Thr696) /FITC 熒光素標記0酸化肌球蛋酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶 96T |
Rhesus antibody Rh BRN3A 轉錄因子Brn3蛋白抗體Brn3α 規(guī)格 0.1ml | IL-33 ELISA Kit 大鼠白細胞介素33 96T |
EEF1D: 延伸因子EF-1δ抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCBE1 膠原蛋白和鈣結合表皮生長因子結構域1抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBsAg 乙型肝炎表面抗原 96T | PABPC4L: 聚腺苷酸養(yǎng)結合蛋白4抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GGPS1 法尼基二0酸合酶1抗體 規(guī)格 0.2ml | NCI-H929-CMV-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細胞 NCI-H929-CMV-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) |
色標法檢測試劑盒NO | CL-0071CT26.WT(小鼠結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser404) 0酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | 上皮細胞生長添加物EpiCGS |
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T | MS751 人子宮頸表皮癌細胞 |
MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細胞) | RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Rhesus antibody Rh CENPA 著絲粒蛋白A 規(guī)格 0.1ml | RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 熒光素標記0酸化突觸后密度蛋白93抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 兔原代呼吸道上皮細胞專用培養(yǎng)基大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] |
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽) | EL4 小鼠淋巴瘤細胞 |
HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病毒株 | 小鼠腦瘤細胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5.本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基正常使用。