詳細(xì)介紹
兔原代骨髓肥大細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代骨髓肥大細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代骨髓肥大細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代骨髓肥大細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代肥大細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IFI35 干擾素誘導(dǎo)35蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Human Cyclin-D1 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Anti-Nogo-B/A /FITC 熒光素標(biāo)記軸索過度生長(zhǎng)抑制因子-B/A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | ALCAM ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser376) 0酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-LAIR-2/CD306/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
AQP-4(Mouse Aquaporin 4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | Centaurin gamma 1: 中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體 0.2ml |
Anti-TSARG7 發(fā)生相關(guān)的新基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CM-H037人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
Lec1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株,ECV304細(xì)胞 TC-1細(xì)胞,HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞 |
FAM3B/PANDER: 胰腺衍生因子抗體 0.2ml | FCAR Others Human 人 FCAR / CD89 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷5aMulti-class antibodies規(guī)格: 48T | 人臍帶靜脈平滑肌細(xì)胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株 Human |
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B | rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 |
Anti-HCV-NS1/FITC 熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 大鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Rhesus antibody Rh APOC3 載脂蛋白C3抗體 規(guī)格 0.2ml | 兔原代骨髓肥大細(xì)胞專用培養(yǎng)基人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse |
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | NFASC Others Human 人 NFASC / Neurofascin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
CRT(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 |
1.使用兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。