詳細介紹
兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基
兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體元 Rattus | Rhesus antibody Rh Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格 0.2ml |
Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody) ELISA Kit 人抗0脂抗體 96T | RNF93: 環(huán)指蛋白93抗體 0.2ml |
Anti-FST/FITC 熒光素標記抗卵泡抑素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Angiotensin II Type 2 Receptor: 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml |
過氧化酶活化增生受體γ抗體 Anti-PPARγ 0.1ml | Anti-CTBP1/FITC 熒光素標記C端結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
p95 NBS1: 細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml |
Hyp ELISA Kit 大鼠羥Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 牦牛皮膚細胞;BMU-S1 |
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞 非洲綠猴腎,BS-C-1細胞 hFOB 1.19(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細胞) | MAPK14 Others Human 人 p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Goat Anti-bovine IgG/Gold 金標記羊抗IgG(10/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml | 人前列腺平滑肌細胞(HPSMC)(5×105) 細胞名稱 種屬 |
OPCML: 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml | 人上皮細胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
HT-29, 人結(jié)腸癌細胞 | CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標簽) |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml | 兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基人慢性髓系白血病細胞;K562 大鼠肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml | CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
801-D細胞,人巨細胞性肺癌細胞 轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細胞,CHO-AA8細胞 CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 |
1.使用兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基正常使用。